古朵提醒：ELISA實驗必須注意的15個問題事項

　　Elisa生物試驗是一種敏感性高，特異性強，重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便，結(jié)果判斷較客觀等因素，已廣泛應用在免疫學檢驗的各領(lǐng)域中。ELISA檢測試劑盒適用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗體ELISA檢測。

　　在ELISA實驗操作所要求的條件是比較嚴格的，無論是對實驗的硬件條件還是對實驗的操作人員的技術(shù)要求，都是如此。下面所提到的就是一些在進行ELISA實驗時所要注意15個問題。

　　1、要保證移液槍的準確性，誤差不能超過2%?？捎盟碗娮犹炱竭M行確定。但最好有專業(yè)人員進行矯正。

　　2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后，要更換槍頭。即使是吸取標準品時。

　　3、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出，使各種試劑都恢復到室溫，以使結(jié)果更穩(wěn)定。

　　4、實驗時，要使底物避光保存。

　　5、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確。

　　6、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。

　　7、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。

　　8、溫浴時，要用封板膜封好酶標板，防止水分的蒸發(fā)。

　　9、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1-2分鐘，使清洗更加。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。

　　10、檢測前，要打開酶標儀，使之穩(wěn)定10分鐘以上。

　　11、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。

　　12、待檢樣品要澄清，否則會影響結(jié)果。

　　13、溫浴時間應遵守試劑盒規(guī)定。

　　14、應盡量做雙孔實驗，這樣才能保證數(shù)據(jù)的準確性。

　　15、對結(jié)果有疑問的樣品要用其它方法進行確證。

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