磷酸化熱休克蛋白27抗體測定步驟：

　　1.抗原包板：15ug/ml 小鼠IgG-pH9.6·CB液 0.1ml/孔;

　　2.37°C包被60min或4°C過;

　　3.PBST洗板3次，5min/次;

　　4.加入倍比稀釋的HRP標(biāo)記抗體 0.1ml/孔;

　　5.37°C 30min;

　　6.PBST洗板5min/次×3;

　　7.底物液0.1ml/孔 37°C 5-10min;

　　8.終止液：2N H2SO4 0.05ml/孔;

　　9.450nm 測定OD值;

　　10.陽性O(shè)D值比對照值大3倍，為判斷效價(jià)稀釋度。

　　磷酸化熱休克蛋白27抗體修復(fù)方法：

　　1，沸水浴修復(fù)，將盛有修復(fù)液和玻片的燒杯置于沸水浴環(huán)境，保持外部沸騰狀態(tài)15min，自然冷卻至室溫。

　　2，微波修復(fù)，將盛有修復(fù)液和玻片的燒杯置于微波爐中，高火5min，?；?min，中火5min，自然冷卻至室溫。

　　磷酸化熱休克蛋白27抗體鑒定方式：

　　1、抗體的效價(jià)鑒定：不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較價(jià)。不同的抗原制備的抗體,要求的效價(jià)不一。鑒定效價(jià)的方法很多,包括有試管 凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),一般就采用瓊脂擴(kuò)散 試驗(yàn)來鑒定。

　　2、抗體的特異性鑒定：抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力?？贵w的特異性高,它的識別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以 交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗(yàn)測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計(jì)算各自的結(jié)合率,求出各自在ic50時(shí)的濃度,并按 公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。

　　如果所用抗原濃度ic50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的ic50濃度幾乎是無窮大時(shí),表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。

　　3、親和力：是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗 體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)k表示,k的單位是l/mol?？贵w親和力的 測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗(yàn)證抗體的均一性等均有重要意義。

　　磷酸化熱休克蛋白27抗體上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品，勵(lì)志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司，產(chǎn)品遠(yuǎn)銷多個(gè)國家和地區(qū)，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經(jīng)營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準(zhǔn)則、以市場需求為導(dǎo)向，不斷開發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品，提供客戶滿意的綜合服務(wù)質(zhì)量"的方針。