??標(biāo)簽：酶聯(lián)免疫試劑盒 古朵生物 ELISA試劑盒

??ELISA試劑盒以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在上得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。古朵生物小編操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給同行帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。下面分析ELISA試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法。

??一、選擇試劑

??選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。

??二、加樣

??可能原因：

??1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;

??2)手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí));

??3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。

??解決辦法：

??1) 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。

??2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。

??3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。

??4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。

??5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。

??三、孵育

??可能原因：

??1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗;

??2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗。

??解決辦法：

??1) 貼封片或加蓋;

??2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。

??四、洗板

??ELISA試劑盒可能原因：

??1) 采用手工洗板，孔與孔之間液體交叉。

??2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不;洗板針堵塞，抽吸不;洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。

??3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。

??解決辦法：

??1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;

??2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。

??五、顯色

??可能原因：

??1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑;

??2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。

??解決辦法：

??1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用;

??2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;

??3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。

??六、終止

??可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。

??七、讀板

??如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。

??如何正確選擇ELISA試劑盒?上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門(mén)從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品，勵(lì)志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司，產(chǎn)品遠(yuǎn)銷多個(gè)國(guó)家和地區(qū)，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經(jīng)營(yíng)宗旨;牢固樹(shù)立“以客戶需求為準(zhǔn)則、以市場(chǎng)需求為導(dǎo)向，不斷開(kāi)發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品，提供客戶滿意的綜合服務(wù)質(zhì)量"的方針。