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??您知道小鼠I型膠原(Col I)ELISA試劑盒檢測原理嗎?
??檢測原理
??試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被I型膠原(Col I)抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的I型膠原(Col I)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。樣品收集、處理及保存方法
??1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
??2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
??3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
??4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
??5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
??自備物品
??1. 酶標(biāo)儀(450nm)
??2. 加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
??3. 37℃恒溫箱
??試劑盒操作注意事項(xiàng)
??1. 試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20 分鐘。從冰箱取出的
??濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用。
??2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
??3. 濃度為0 的S0 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對照或者空白;按照說明書操作時(shí)樣本已經(jīng)稀釋5 倍,zui終結(jié)果乘以5 才是樣本實(shí)際濃度。
??4. 嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。
??5. 所有液體組分使用前充分搖勻。
??小鼠(Mouse)I型膠原(Col I)ELISA檢測試劑盒 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品,勵(lì)志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司,產(chǎn)品遠(yuǎn)銷多個(gè)國家和地區(qū),我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經(jīng)營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準(zhǔn)則、以市場需求為導(dǎo)向,不斷開發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品,提供客戶滿意的綜合服務(wù)質(zhì)量"的方針。
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