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上海古朵生物科技有限公司

古朵生物| 三組織切片染色操作步驟

時間:2023-2-3閱讀:883
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  ??古朵生物| 三組織切片染色操作步驟

 

  ??1、Giemsa工作液的配制: 按試劑(A): 試劑(B) =1:9配制Giemsa stain工作液,即取1份的Giemsa stain儲存液(10×)加入到9份的磷酸鹽緩沖液中,充分混勻,即為Giemsa stain工作液。配制后的Giemsa stain工作液為即用型試劑,不易保存,即用即配。

  ??2、新鮮組織立即置于Regaud固定液固定2天,期間應(yīng)換1次固定液。

  ??3、3%的重鉻酸jia固定1天。

  ??4、流水沖洗16個小時或過夜。

  ??5、按照常規(guī)脫水、包埋。

  ??6、切片,厚度約為5μm。

  ??7、常規(guī)脫蠟至水。

  ??8、蒸餾水清洗2次,每次約1min。

  ??9、置于含有Giemsa stain工作液的染缸內(nèi),浸染18~24h。

  ??10、蒸餾水稍微清洗。

  ??11、0.1~0.5%的乙酸洗1~2min。

  ??12、自來水稍洗。

  ??13、用無水乙醇迅速脫水3次,每次5~10s。

  ??14、二jia苯透明。

  ??15、中性樹脂封固。

  ??染色結(jié)果:

  ??細胞核藍色至紫色

  ??細胞質(zhì)淡藍色

  ??嗜鉻細胞胞質(zhì)黃綠色

  ??結(jié)締組織淡紅色

  ??注意事項:

  ??1、 血液涂片或骨髓涂片應(yīng)厚薄均勻,以免影響染色結(jié)果。

  ??2、 涂片染色中Giemsa染色后,請勿先去除染液或直接對涂片用力沖洗。

  ??3、 如果染色過深或過淺,應(yīng)調(diào)整染色時間或工作液的濃度。

  ??4、 Giemsa涂片染色和組織切片染色中,pH值對染色有一定影響,載玻片應(yīng)清潔無酸 堿污染以免影響染色結(jié)果。

  ??5、染色液在稀釋后液面應(yīng)有金屬光澤,表示染液有染色作用,否則染色液可能失效。 6、 Giemsa組織切片染色中,染色后需用大量0.1~0.5%的乙酸急速沖洗,避免浮面 沉淀 物污染切片后難以洗脫。

  ??7、0.1~0.5%的冰乙酸分化,常用于Giemsa組織切片染色,如有必要亦可用于細胞涂片,但其濃度應(yīng)適量下調(diào)。0.5%的冰乙酸分化切片時,切片呈粉紅色即可終止。

  ??8、Giemsa組織切片染色中,無水乙醇脫水要迅速,否則切片易褪色。

  ??9、Giemsa涂片染色和組織切片染色中,如需急速獲得結(jié)果,可以按Giemsa stain儲存液:磷酸鹽緩沖液(1×) =1:1配制,即取吉姆薩儲存液(10×)1份、磷酸鹽緩沖液(1×)1份,充分混勻,即為快速吉姆薩染色工作液,將染色液滴加于細胞涂片或組織切片上,加熱染色,20~30s后重新加染色液,反復(fù)5~10次,其余步驟同上。

  ??10、染色液可重復(fù)使用,但不能多次重復(fù),若有沉淀物應(yīng)過濾后使用。

  ??11、Regaud固定液:按3%重鉻酸jia水溶液:甲醛=4:1配制,臨用前混勻,1~2天后失效。

  ??12、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。 13、使用場所應(yīng)通風(fēng),并遠離火源。

  ??有效期: 24個月有效甲基綠。

  ??三組織切片染色操作步驟 古朵既能滿足研發(fā)類客戶對產(chǎn)品種類、包裝、純度的特殊要求,也能滿足生產(chǎn)型企業(yè)從小試、中試到規(guī)?;a(chǎn)各個階段的綜合需求。產(chǎn)品涵蓋有機試劑、無機試劑和生 化試劑,標準物質(zhì)、天然植物提取物及中藥標準品,核酸、酶、緩沖劑、顯色底物,醫(yī)藥中間體、原料藥、催化劑、高純?nèi)軇?、特種高分子材料及實驗室常用耗材。 品種類超過2萬種,廣泛應(yīng)用于細胞藥理、藥劑、分子生物學(xué)等科研領(lǐng)域。

 

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