古朵帶您了解、細(xì)胞凍存液的配方嗎？

　　假如要想做到那樣的目地，那么就需要體細(xì)胞冷凍液，這類東西如何配備呢?下邊就來(lái)實(shí)際的了解一下，細(xì)胞凍存液的秘方是啥?

　　細(xì)胞凍存液的配方是什么?

　　(一)細(xì)胞凍存

　　1. 配置含10%DMSO或凡士林、10～20%小牛血清的凍存細(xì)胞培養(yǎng)液;

　　2. 取對(duì)數(shù)成長(zhǎng)期的體細(xì)胞，除去舊細(xì)胞培養(yǎng)液，用PBS清理。

　　3. 除去PBS，添加適量蛋白酶(遮蓋細(xì)胞培養(yǎng)皿表層)把單面生長(zhǎng)發(fā)育的體細(xì)胞消化吸收出來(lái);

　　4. 抽濾1000rpm，5min;

　　5. 除去蛋白酶，添加適量配置好的凍存細(xì)胞培養(yǎng)液，用塑料吸管輕輕地吹打使體細(xì)胞勻稱，記數(shù)，調(diào)整凍存液中體細(xì)胞的后相對(duì)密度為5牙周106/ml～1牙周107/ml;

　　6. 將體細(xì)胞分裝進(jìn)凍存管中，每管1～1.5 ml;

　　7. 在凍存管上標(biāo)出體細(xì)胞的名字，凍存時(shí)間及作業(yè)者;

　　8. 凍存：標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序流程為減溫速度-1～-2℃/min;當(dāng)溫度達(dá)-25℃下列時(shí)，可升至-5℃～-10℃/min;到-100℃時(shí)，則可快速滲入液態(tài)氮中。也可將配有體細(xì)胞的凍存管放進(jìn)-20℃電冰箱2h，隨后放進(jìn)-70℃電冰箱中留宿，取下凍存管，移進(jìn)液氮容器內(nèi)。

　　(二) 細(xì)胞復(fù)蘇

　　1. 從液氮容器中取下凍存管，立即滲入37℃溫開水中，并時(shí)常搖晃令其盡早溶化。

　　2. 從37℃水浴中取下凍存管，開啟外蓋，用塑料吸管吸出來(lái)體細(xì)胞懸液，加到離心管并滴加10倍以上細(xì)胞培養(yǎng)液，攪拌;

　　3. 抽濾， 1000rpm，5min;

　　4. 棄去上清液，添加含10%小牛血清細(xì)胞培養(yǎng)液重懸體細(xì)胞，記數(shù)，調(diào)節(jié)體細(xì)胞相對(duì)密度，打疫苗塑造瓶，37℃恒溫箱靜放塑造;

　　5. 隔日拆換一次細(xì)胞培養(yǎng)液，再次塑造。

　　常見問題：

　　1.從繁衍期到產(chǎn)生高密度的單層細(xì)胞之前的塑造體細(xì)胞都能夠用以凍存，但最/好是為多數(shù)成長(zhǎng)期體細(xì)胞。在凍存前一天*是換一次細(xì)胞培養(yǎng)液;

　　2.將凍存管放進(jìn)液氮容器或從這當(dāng)中取下時(shí)，要搞好安全防護(hù)工作中，以防凍傷;

　　3.凍存和再生最/好用新配置的細(xì)胞培養(yǎng)液。

　　細(xì)胞凍存液 古朵既能滿足研發(fā)類客戶對(duì)產(chǎn)品種類、包裝、純度的特殊要求，也能滿足生產(chǎn)型企業(yè)從小試、中試到規(guī)?；a(chǎn)各個(gè)階段的綜合需求。產(chǎn)品涵蓋有機(jī)試劑、無(wú)機(jī)試劑和生 化試劑，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、天然植物提取物及中藥標(biāo)準(zhǔn)品，核酸、酶、緩沖劑、顯色底物，醫(yī)藥中間體、原料藥、催化劑、高純?nèi)軇⑻胤N高分子材料及實(shí)驗(yàn)室常用耗材。 品種類超過2萬(wàn)種，廣泛應(yīng)用于細(xì)胞藥理、藥劑、分子生物學(xué)等科研領(lǐng)域。