【古朵生物】ELISA試劑盒的運用過程及操作方法

　　ELISA試劑盒操作較繁雜,在操作中應(yīng)留神以下5個方面。

　　1. 跟著病況的進展或由其他因素影響，某些抗體在機體內(nèi)的含量發(fā)作大幅動搖，因此有必要對標本進行預(yù)處理。間接法測定中，標本恰當稀釋還可下降非特異性反響。

　　2. 加樣一般運用加液器，在ELISA試劑盒中一般有4次加樣：加標本、加酶結(jié)合物、加底物和加間斷液。加標本時有必要每份標本運用一支移液器吸嘴，避免交叉污染。加酶結(jié)合物、底物和間斷液時則不需更換吸嘴。

　　3.在成批手藝檢測中，還應(yīng)留神操作時差的影響。加樣及混勻時間的差異，使抗原抗體反響和酶促反響時間不一致，對競爭法及定量檢測影響很大，不留神可能會導(dǎo)致過錯效果或定量不準。

　　4. 洗刷是ELISA試劑盒操作過程中決議實驗勝敗的一個關(guān)鍵步驟。目的是除掉未結(jié)合的免疫反響物，間斷抗原抗體反響，除掉標本中與反響無關(guān)的成分、游離的酶標物以及反響過程中吸附于固相載體上的非特異性物質(zhì)。

　　5. 斷定效果須運用ELISA試劑盒測讀儀，比色法判讀可選擇單波長或雙波長，根據(jù)反響液顏色的不同選用不同波長的濾光片，以空白孔校零測定反響孔的吸光度值。酶標儀具有杰出的重復(fù)性。

　　ELISA試劑盒用于檢測的樣品應(yīng)保持新鮮.

　　2.用戶在初度運用試劑盒時,應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘,以便試劑集中到管底.

　　3.每次試驗留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是zui后加底物溶液及2N H2SO4.丈量時先用此孔調(diào)OD值至零.

　　4.要確保微量加樣器的精確性,能夠運用蒸餾水和電子天平進行確定(因為蒸餾水不含雜質(zhì),溫度環(huán)境為20%左右時,lmL的水能夠看作是lg 200 L的水能夠看作是0.2g)每一把微量加樣器都應(yīng)該將其zui高量程和zui低量程進行確定.

　　5.因為底物顯色劑對光及其靈敏,因此要避光保存.

　　6.手藝洗板時每次參加洗滌液后.應(yīng)靜置15～30s,不要將一個酶標孑L中的洗滌液濺入另一酶標孔中,防止交叉污染.甩去洗滌液后將酶標板放在毛巾或吸水紙上拍干.

　　7.檢測吸光度前應(yīng)將酶標儀翻開,將其預(yù)熱30min以上.

　　8.ELISA試劑盒底物為TMB,防止與皮膚相觸摸.終止液為2tool的濃硫酸具有腐蝕性,應(yīng)盡量防止觸摸皮膚.

　　9.孵育的時間應(yīng)該嚴格依照試劑盒說明書上的時間為準.

　　10.對樣本的結(jié)果有疑問時需要運用其他檢測方法進行驗證.

　　11.沒有去離子水或雙蒸水時,能夠運用娃哈哈純凈水配制溶液,切勿運用自來水.

　　12.在運用微量加樣器時,汲取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使汲取標準品溶液.

　　13.汲取液體時速度不易太快,以免發(fā)生氣泡,汲取的量不夠精確.

　　14.將液體加到酶標孔中時,防止槍頭和孔內(nèi)液體觸摸,可使槍頭上的液滴和孑L壁觸摸,液滴會自然流下去.吸入液體時的方法是吸兩檔打一檔,防止因為槍頭的毛細作用使得部分液體不能流出而造成的誤差.

　　15.ELISA試劑盒汲取液體時要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差.

　　16.試驗前30min將試劑盒中的一切試劑從冰箱取出,使試劑盒中的一切試劑與提取好的樣品溶液的溫度相同,酶標板只需取出所需量.

　　【古朵生物】ELISA試劑盒 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品，勵志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司，產(chǎn)品遠銷多個國家和地區(qū)，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經(jīng)營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導(dǎo)向，不斷開發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品，提供客戶滿意的綜合服務(wù)質(zhì)量"的方針。