??抗體,也叫免疫球蛋白 (Ig),是一種能特異性結(jié)合抗原的糖蛋白,而抗原是在易感染動物體內(nèi)引發(fā)抗體產(chǎn)生的物質(zhì)。

　　??在體內(nèi),抗體是由于外 源性分子的侵襲而產(chǎn)生的?？贵w以一個或者多個 Y 字形單體存在, 每個 Y 字形單體由 4 條多肽鏈組成,包含兩條相同的重鏈和兩條相同的輕鏈。

　　??輕鏈和重鏈?zhǔn)歉鶕?jù)它們的分子量大小來命名的。Y 字形結(jié)構(gòu)的頂端是可變區(qū),為抗原結(jié)合部位。

　　??任何一個抗體的輕鏈都可以分為κ或λ型(基于小分子多肽結(jié)構(gòu)上的差異),每一個抗體的重鏈則決定了它的類或型。

　　??抗體與免疫球蛋白

　　??抗體(antibody，Ab)：是由抗原進(jìn)入機(jī)體刺激B細(xì)胞分化增殖為漿細(xì)胞而合成并分泌的一類能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合并產(chǎn)生免疫效應(yīng)的含有糖基的球蛋白?？贵w分布于體液(血液、淋巴液、組織液及粘膜的外分泌液)中，主要存在于血清內(nèi)。

　　1964年世界衛(wèi)生組織召開會議，將具有抗體活性及化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗體相似的球蛋白統(tǒng)稱為免疫球蛋白(immunoglobulin，Ig)。免疫球蛋白除分布于體液中之外，還可存在于B細(xì)胞膜上。現(xiàn)代免疫學(xué)認(rèn)為，抗體與免疫球蛋白是等同的概念;只是抗體側(cè)重于其生物學(xué)活性的描述，而免疫球蛋白側(cè)重強(qiáng)調(diào)其化學(xué)結(jié)構(gòu)。

　　??抗體的分類

　　??1、免疫球蛋白可分為兩種類型：(1) 分泌性免疫球蛋白：存在于血清、體液以及分泌液中，具有抗體的各種功能。(2) 膜型免疫球蛋白：位于B淋巴細(xì)胞的表面，即膜表面免疫球蛋白(mIg)，是B淋巴細(xì)胞的抗原識別受體(BCR)。2、根據(jù)所對應(yīng)的抗原分：

　　??3、根據(jù)有無抗原刺激分：

　　??4、根據(jù)與抗原反應(yīng)的性質(zhì)分：

　　??5、根據(jù)抗原性分：

　　??免疫球蛋白的理化性質(zhì)

　　??免疫球蛋白是多鏈糖蛋白，具有蛋白質(zhì)的通性，對物理及化學(xué)因素敏感，不耐熱，在60～70℃時即被破壞，能被多種蛋白水解酶裂解破壞，可在乙醇、中性鹽類中沉淀。因此，通常用50%飽和硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中提取抗體。

　　??抗體的結(jié)構(gòu)

　　??一、單體

　　??Porter等對血清IgG抗體的研究證明：Ig分子的基本結(jié)構(gòu)是由四肽鏈組成的。即：由二條相同的分子量較小的肽鏈(輕鏈)和二條相同的分子量較大的肽鏈(重鏈)組成。

　　??輕鏈與重鏈?zhǔn)怯啥蜴I連接形成一個四肽鏈分子稱為Ig分子的單體;單體是構(gòu)成所有免疫球蛋白分子的基本結(jié)構(gòu);所有抗體的單體都是四條肽鏈的對稱結(jié)構(gòu)，即：兩條糖基化重鏈(H)和兩條非糖基化輕鏈(L);每條重鏈和輕鏈分為氨基端(N端)和羧基端(C端)。

　　??二、輕鏈和重鏈1、輕鏈(light chain，L鏈)由214個氨基酸殘基組成，通常不含碳水化合物，分子量為24kD，有兩個由鏈內(nèi)二硫鍵組成的環(huán)肽，L鏈可分為：Kappa(κ)與 lambda(λ)2個亞型。2、重鏈(heavy chain，H鏈)由450-550個氨基酸殘基組成，分子量55-75kD，含糖數(shù)量不同，4-5個鏈內(nèi)二硫鍵，可分為5類，μ、γ、α、δ、ε鏈，不同的H鏈與L鏈(κ或λ)組成完整的Ig分子。分別稱為：IgM，IgG，IgA，IgD和IgE。

　　??三、可變區(qū)和恒定區(qū)

　　????通過對H鏈或L鏈的氨基酸序列比較分析，發(fā)現(xiàn)：

　　???? 其N-末端序列變化很大，稱此區(qū)為可變區(qū)(V區(qū));

　　???? C-末端氨基酸則相對穩(wěn)定，變化很小，稱此區(qū)為恒定區(qū)(C區(qū))。

　　??1、可變區(qū)(Variable region，V區(qū))

　　??L鏈N端1/2處(VL)108-111個氨基酸殘基，H鏈N端1/5-1/4處(VH)118個氨基酸殘基，V區(qū)有一個肽環(huán)65-75個氨基酸殘基。

　　??可變區(qū)可分為高變區(qū)(hypervariable region，HVR)和骨架區(qū)(framework region，F(xiàn)R)，VL的HVR在24-34，50-56，89-97氨基酸位置。VH的HVR在31-35，50-56，95-102氨基酸位置。分別稱為VL和VH的HVR1，HVR2，HVR3。

　　??高變區(qū)為抗體與抗原的結(jié)合位置，稱為決定簇互補(bǔ)區(qū)(complementarity-determining region，CDR)，VL和VH的HVR1，HVR2，HVR3又分別稱為CDR1，CDR2，CDR3，其中CDR3具有高的高變程度，H鏈在與抗原結(jié)合中起重要的作用。

　　??2、恒定區(qū)(constant region，C區(qū))

　　??L鏈C端1/2處，105個氨基酸殘基，H鏈C端3/4-4/5處，331-431個氨基酸殘基。在同一種屬動物中是比較恒定的，是制備第二抗體進(jìn)行標(biāo)記的重要基礎(chǔ)。

　　??四、功能區(qū)

　　??鏈內(nèi)二硫鍵折疊成球形區(qū)稱為功能區(qū)(domain)約由110個氨基酸組成。氨基酸的順序具有高度的同源性。

　　??1、L鏈功能區(qū)：2個，(VL，CL各一個)

　　??2、H鏈功能區(qū)：IgG，IgA，IgD，4個(V區(qū)1個，C區(qū)3個)，IgM，IgE，5個(V區(qū)1個，C區(qū)4個)

　　??3、功能區(qū)的β片層結(jié)構(gòu):抗體的L鏈和H鏈中V區(qū)或C區(qū)每個功能區(qū)的二級結(jié)構(gòu)是反向平行的β片層結(jié)構(gòu)。

　　4、功能區(qū)的作用：

　　??(1)VL和VH是抗原結(jié)合的部位。

　　??(2)CL和CH1上具有同種異型的遺傳標(biāo)記。

　　??(3)IgG的CH2和IgM的CH3具有補(bǔ)體C1q結(jié)合位點(diǎn);IgG借助CH2部分可通過胎盤

　　??(4)CH3或CH4具有結(jié)合單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、粒細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞Fc段受體的功能，不同的抗體可與不同的細(xì)胞結(jié)合，產(chǎn)生不同的免疫效應(yīng)。

　　??5、鉸鏈區(qū)

　　??(1)鉸鏈區(qū)不是一個的功能區(qū)，位于CH1與CH2之間;包括H鏈間二硫鍵，該區(qū)富含脯氨suan，不形成α-螺旋。

　　??(2)當(dāng)Ab與Ag結(jié)合時，鉸鏈區(qū)發(fā)生扭曲，使Ab的2個抗原結(jié)合點(diǎn)好地與2個抗原決定簇互補(bǔ)。

　　??(3)由于CH2和CH3構(gòu)型變化,顯示出活化補(bǔ)體、結(jié)合組織細(xì)胞等生物學(xué)活性。

　　??(4)含有木瓜蛋白酶、胃蛋白mei的水解位點(diǎn)。

　　??五、酶解片段

　　??1.木瓜蛋白酶的水解片段1959年 Porter用木瓜蛋白酶(papain)水解兔IgG分子，將IgG從絞鏈區(qū)二硫鍵的近N端側(cè)切斷，從而將免疫球蛋白裂解為三個片段，即2個相同的Fab段和1個Fc段。每一個Fab段即抗原結(jié)合片段(fragment antigen binding，F(xiàn)ab)，含有一條完整的L鏈和H鏈近N 端側(cè)的1/2。每個Fab段結(jié)合抗原是單價的，即只能結(jié)合一個抗原決定簇。因此不能連結(jié)成較大的抗原抗體復(fù)合物，不出現(xiàn)凝集或沉淀現(xiàn)象。Fab中的約1/2 H鏈部分稱為Fd段，約含225個氨基酸殘基，包括VH、CH1和部分絞鏈區(qū)。Fc段在低溫或低離子強(qiáng)度下可形成結(jié)晶，故稱為可結(jié)晶片段(fragment crystallizable，F(xiàn)c)，F(xiàn)c段含有兩條H鏈羧基端(C端)的一半，包含CH2和CH3兩個功能區(qū)，它無抗體活性。Ig在異種間免疫所具有的抗原性主要存在于Fc段，同時Fc段還具有活化補(bǔ)體、親細(xì)胞、通過胎盤和介導(dǎo)與細(xì)菌蛋白結(jié)合等生物學(xué)活性。

　　??2、胃蛋白mei水解片段

　　??1960年Nisonoff等早用胃蛋白mei水解兔IgG分子，可將IgG從絞鏈區(qū)重鏈間二硫鍵近C端切斷，將其裂解為大小不等的兩個片段。大片段為1個Fab雙體，以F(ab')2表示。F(ab')2由一對L鏈和一對略大于Fd的H鏈(稱為Fd')組成。Fd'約含有235個氨基酸殘基，包括VH、CH1和絞鏈區(qū)。F(ab')2結(jié)合抗原為雙價，可結(jié)合兩個抗原決定簇，其結(jié)合抗原的親合力要大于單價的Fab，與抗原結(jié)合后可出現(xiàn)凝集或沉淀現(xiàn)象。由于F(ab')2保持了結(jié)合相應(yīng)抗原的生物學(xué)活性，又減少或避免了Fc段抗原性可能引起的副作用，因而在生物制品中有實際應(yīng)用價值。雖然F(ab')2在與抗原結(jié)合特性方面同完整的Ig分子一樣，但由于缺乏Ig中的Fc部分，故不具備固定補(bǔ)體及與細(xì)胞膜表面Fc受體結(jié)合的功能。小片段Fc可被繼續(xù)水解為小分子多肽，以Fc'表示，不再具有任何生物學(xué)活性。

　　??六、J鏈和分泌成分

　　??1、J鏈(joining chain)(1)存在于二聚體IgA和五聚體IgM中;化學(xué)本質(zhì)為酸性糖蛋白，分子量約15ku，含有8個半基。(2)以二硫鍵連接到μ鏈或α鏈的羧基端的半胱氨suan/，對抗體二聚體、五聚體的組成及在體內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)具有一定的作用。

　　??2、分泌成分(secretory component，SC)

　　??(1)是二聚體IgA上的一個輔助成分;(2)由上皮細(xì)胞合成，化學(xué)本質(zhì)為糖蛋白，分子量約為75ku;(3)以共價形式結(jié)合到IgA分子，并一起被分泌到粘膜表面，又稱分泌片(secretory piece, SP);(4)可抵抗外分泌液中的蛋白水解酶對二聚體IgA的降解。

　　??上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品，勵志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司，產(chǎn)品遠(yuǎn)銷多個國家和地區(qū)，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經(jīng)營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準(zhǔn)則、以市場需求為導(dǎo)向，不斷開發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品，提供客戶滿意的綜合服務(wù)質(zhì)量"的方針。