Gibco胎牛血清新西蘭中的懸浮物問題解答

　　1.血清的滅活

　　1、問：發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)的細(xì)胞瓶中背景有許多的小黑點，培養(yǎng)液中也有一些漂浮的物?？戳酥暗奶詾槭悄z原蟲。本打算換液，換液前特意看了下前些天配的培養(yǎng)液，肉眼發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液中有懸浮的顆粒狀物質(zhì)(不多)，于是放在鏡下觀察，新鮮培養(yǎng)液中有一些懸浮的小顆粒，不多。(培養(yǎng)液是R1640+20%Gibco小牛血清+1%雙抗)于是又將分裝在4℃保存的小牛血清拿出觀察，肉眼可見5、6個白色小小球狀的物質(zhì)，在血清瓶稍靠下的部位懸浮。鏡下觀察，也有少量的不知什么物質(zhì)的東西漂浮。小牛血清是Hyclone新西蘭的，標(biāo)簽上寫已經(jīng)經(jīng)過2μm濾膜過濾處理。根據(jù)上述培養(yǎng)液的情況，是否說明培養(yǎng)液已被污染?如果是正常的血清是不是在鏡下不應(yīng)該看到雜物，哪怕是極少量的?根據(jù)上述血清的描述，是不是說明血清也存在問題，還能用嗎?補(bǔ)充：細(xì)胞培養(yǎng)以來生長狀態(tài)就不好。買血清的時候廠家說明不用滅活，所以未滅活。

　　答：

　　(1)Gibco血清應(yīng)該-20℃保存，解凍血清時，請按照的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫)，若血清解凍時改變的溫度太大實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。

　　(2)Gibco澳洲血清10099141中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因，但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成，而血纖維蛋白在Gibco胎牛血清解凍后，也會存在于血清(例如Gibco新西蘭胎牛血清10091148)中，亦可造成沉淀物。

　　(3)若您一次無法用完一瓶，建議您無菌分裝血清，再放回冷凍，若存放于4℃時，請勿超過一個月，儲存在2-8℃時，血清中的各種蛋白和脂蛋白，可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。

　　(4)解凍Gibco胎牛血清時，請隨時將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。

　　(5)排出了Gibco血清(例如Gibco新西蘭胎牛血清10091148)的原因，在考慮實驗用品和無菌操作的問題。

　　(6)細(xì)菌病毒、衣原體、黑膠蟲污染也很常見，如果細(xì)胞死的太多，影響較大建議更換培養(yǎng)液。

　　2、問：今天在配培養(yǎng)液時，發(fā)現(xiàn)Gibco血清里面有小碎片樣的漂浮物，血清仍然清亮，不渾濁。不知道是什么，問了實驗室的學(xué)長，說仍然可以用，但還是不放心，沒有用血清。求助園子的各位達(dá)人，這可能是血清出了什么問題?我的血清用了一個月不到，四季青的。

　　答：可能的原因：(1)培養(yǎng)液配置時Votex不夠，當(dāng)時是清亮的，但過一段時間會析出來;(2)真菌污染。

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