Elisa試劑盒操作流程及實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析

　　elisa試劑盒操作流程

　　不同廠家對于elisa試劑盒的操作要求也不盡相同，有些需要放置-20℃，有些則需要4℃保存，即使是同樣的試劑盒，每個(gè)人對說明書的解讀也有萬千差異，以洗板后的拍板為例，一千個(gè)人閱讀說明書，就有一千種拍板方式。不少人甚至認(rèn)為ELISA操作是個(gè)體力活，拿出科比扣籃的架勢；還有小伙伴突發(fā)奇想，讓孔板自然干燥，最終出現(xiàn)了讀數(shù)高、CV值高、背景高的「三高」結(jié)果。此時(shí)若有一則操作視頻指導(dǎo)，便能一目了然。

　　一、說明書中洗板步驟

　　Manual：Discard the solution in the plate without touching the side walls.Clap the plate on absorbent filter papers or other absorbent material.Fill each well completely with 350ul wash buffer and soak for 1 to 2 minutes,then aspirate contents from the plate,and clap the plate on absorbent filter papers or other absorbent material.

　　因此，除了操作說明書上詳盡的操作步驟，我們更是精心制作出ELISA試劑盒的教學(xué)視頻，以方便初學(xué)者在使用，視頻內(nèi)容包括操作步驟、實(shí)驗(yàn)細(xì)節(jié)、注意事項(xiàng)等，手把手帶您入門，確保實(shí)驗(yàn)的每一步都順利進(jìn)行。

　　二、實(shí)驗(yàn)小貼士

　　1.在收到試劑盒后，為保證檢測效果，需要根據(jù)說明書中保存條件正確儲(chǔ)存。除非特別注明，試劑盒大多是在2～8°C條件下儲(chǔ)存；

　　2.在實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前，請確認(rèn)包裝中的試劑盒成分與說明書一致，再進(jìn)行后續(xù)操作；

　　3.溶解標(biāo)準(zhǔn)品過程中，注意標(biāo)準(zhǔn)品是否受潮，過程中要避免產(chǎn)生泡沫；

　　4.為了避免交叉污染，配置不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品、上樣、加不同試劑都需要更換槍頭。另外不同試劑請分別使用不同的移液槽；

　　5.每次孵育時(shí)，正確使用封板膠紙可保證結(jié)果的準(zhǔn)確性；

　　6.正確洗板有助于實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性；

　　7.TMB顯色底物在上板前應(yīng)為無色，請避光保存。加入孔板后，將由無色變成不同程度的藍(lán)色；

　　8.終止液上板順序需與底物上板順序一致，加入終止液，溶液顏色由藍(lán)色變?yōu)辄S色。如果出現(xiàn)綠色，即表明終止液與底物未混勻，請充分混合。

　　ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析：

　　1、ELISA實(shí)驗(yàn)中樣品都要做復(fù)孔或三孔，然后計(jì)算每個(gè)濃度標(biāo)準(zhǔn)品的平均OD值，復(fù)孔的變異系數(shù)應(yīng)該小于20%。

　　2、平均OD值減去空白孔的OD值。

　　3、制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。以減去本底后的OD值為X軸，標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為Y軸，利用作圖軟件得出一個(gè)合適的計(jì)算方法。建議使用合適的軟件來作圖，比如CurveExpert 1.4。這款軟件能夠給出很多種方法（比如直線、半對數(shù)、對數(shù)、四參數(shù)方程等）并從中選擇一條最合適的方程。要想檢驗(yàn)?zāi)硹l曲線是否與表中數(shù)據(jù)吻合，可以將標(biāo)準(zhǔn)品的濃度作為未知數(shù)，將對應(yīng)的OD值帶入該方程，計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)品的濃度，得到的結(jié)果應(yīng)該與實(shí)際濃度很接近（+/-10%）。選擇擬合度最高的那條曲線。

　　ELISA試劑盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品，勵(lì)志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司，產(chǎn)品遠(yuǎn)銷多個(gè)國家和地區(qū)，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經(jīng)營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準(zhǔn)則、以市場需求為導(dǎo)向，不斷開發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品，提供客戶滿意的綜合服務(wù)質(zhì)量"的方針。