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ELISA試劑盒在使用時(shí)如何選擇?

時(shí)間:2022-9-7閱讀:642
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  標(biāo)簽:ELISA試劑盒 古朵生物 酶聯(lián)試劑盒


  ELISA試劑盒在使用時(shí)如何選擇?


  一、根據(jù)實(shí)驗(yàn)物種及待檢樣品性質(zhì)來(lái)選擇ELISA

  如果實(shí)驗(yàn)君的實(shí)驗(yàn)樣品為人、小鼠或大鼠樣品,那么要選擇一個(gè)合適的試劑盒相對(duì)容易,但如果您的實(shí)驗(yàn)樣品來(lái)源于其他物種如雞、牛、猴等,則市面上能提供的試劑盒種類(lèi)卻很少。且不可輕信能提供近萬(wàn)種試劑盒,覆蓋多物種的供應(yīng)商。但如果又非要檢測(cè)這些物種的指標(biāo)時(shí),最好要對(duì)待檢物(如有種屬差異性)進(jìn)行同源性分析以及試劑盒的種屬交叉反應(yīng)數(shù)據(jù)。對(duì)于樣品類(lèi)型而言,一般的商業(yè)化試劑盒都經(jīng)過(guò)血清、血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清液的驗(yàn)證。在選擇試劑盒時(shí),最好要詳細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū),比如血漿樣本抗凝劑的使用是否與試劑盒兼容。另外,在某些情形下樣品中會(huì)存在干擾因素比如溶血血漿、高脂肪含量的樣品、人抗鼠抗體(HAMA)、細(xì)胞培養(yǎng)上清中含胎牛血清等。因此需根據(jù)樣品來(lái)選擇試劑盒,必要時(shí)還要根據(jù)樣本來(lái)適當(dāng)優(yōu)化。或在樣品收集前,最好先閱讀一些可靠供應(yīng)商試劑盒的說(shuō)明書(shū)或直接咨詢(xún)。如果您的樣品為組織或細(xì)胞裂解物,則需要更謹(jǐn)慎的選擇試劑盒。市面上大多數(shù)的商業(yè)化試劑盒沒(méi)有經(jīng)過(guò)多種來(lái)源組織樣本的驗(yàn)證。這需要實(shí)驗(yàn)君能理解不是所有試劑盒所用的抗體對(duì),都能特異的從一堆裂解物蛋白中特異檢出您的目的蛋白,還要考慮組織樣品的基質(zhì)效應(yīng)(Matrix Effect)等。但如果實(shí)驗(yàn)君要了解組織樣品的制備問(wèn)題,我們另起一文來(lái)總結(jié)。

  二、細(xì)致比較試劑盒關(guān)鍵性技術(shù)參數(shù)

  古朵生物ELISA試劑盒的關(guān)鍵技術(shù)參數(shù)包括板內(nèi)差異性、板間差異性、批間差異性、重復(fù)性、特異性及交叉反應(yīng)性、回收率等。如果實(shí)驗(yàn)君經(jīng)常開(kāi)展ELISA實(shí)驗(yàn),建議使用同一廠家的試劑盒,這樣可盡量保證數(shù)據(jù)的重復(fù)性(當(dāng)然前提是實(shí)驗(yàn)條件的一致性)。對(duì)于科研用的定量ELISA試劑盒,不同的生產(chǎn)廠家使用的抗體對(duì)、酶以及底物、生產(chǎn)工藝和研發(fā)實(shí)力不盡相同,自然不同廠家試劑盒測(cè)出的數(shù)據(jù)會(huì)有差異。

  三、根據(jù)樣品中檢測(cè)物水平來(lái)選擇試劑盒

  如果實(shí)驗(yàn)君對(duì)于樣品中待檢物的水平?jīng)]有任何可參考的數(shù)據(jù),選擇寬動(dòng)力學(xué)檢測(cè)范圍的試劑盒。如果樣品中待檢物的含量很低,建議選擇高靈敏度的試劑盒。為了降低基質(zhì)效應(yīng),有必要用稀釋液至少做2倍稀釋。如果樣品中待檢物含量遠(yuǎn)超過(guò)試劑盒的檢測(cè)范圍(標(biāo)曲范圍), 也需做適當(dāng)?shù)谋稊?shù)稀釋。在最后計(jì)算結(jié)果時(shí),需乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

  四、供應(yīng)商資質(zhì)評(píng)估

  縱觀國(guó)內(nèi)外ELISA試劑盒供應(yīng)商,估計(jì)至少100余家。有些供應(yīng)商可提供數(shù)百種常用指標(biāo)ELISA,然而有些供應(yīng)商則聲稱(chēng)可提供數(shù)千種甚至上萬(wàn)種指標(biāo)的試劑盒,但質(zhì)量參差不齊,更有濫竽充數(shù)禍害科研之輩。那如果選擇供應(yīng)商呢?

  1、從同行或?qū)嶒?yàn)室同僚了解供應(yīng)商的口碑,售前售后的處理情況。

  2、查詢(xún)供應(yīng)商的wang站詳細(xì)了解相關(guān)指標(biāo),可查詢(xún)這些指標(biāo)是否已經(jīng)開(kāi)發(fā)出特異性抗體?如果查遍全球連抗體都還不可獲取,又如何開(kāi)發(fā)出ELISA試劑盒呢? 

  4、了解供應(yīng)商的研發(fā)歷史和品牌史,很多供應(yīng)商頻頻更換公司名或更換公司注冊(cè)地,其中名堂實(shí)驗(yàn)君應(yīng)該能悟出。

  五、根據(jù)樣本可獲得性來(lái)選擇試劑盒

  通常而言,商業(yè)化試劑盒的樣品用量都在50ul或100ul, 但也有一些供應(yīng)商的試劑盒對(duì)樣品的用量要求可少至10ul。如果您的樣品很珍貴或較難獲取,則需要認(rèn)真考慮試劑盒對(duì)樣品用量的要求。如果樣品量少,且要做多因子檢測(cè)時(shí)更需謹(jǐn)慎。

  六、經(jīng)費(fèi)預(yù)算

  說(shuō)了半天,還是要看課題經(jīng)費(fèi)的預(yù)算。沒(méi)經(jīng)費(fèi)咋搞科研呢?一般質(zhì)量可靠,文獻(xiàn)引用多。但國(guó)際品牌由于進(jìn)口和國(guó)際運(yùn)輸?shù)瘸杀据^高,因此售價(jià)也較高。其實(shí)國(guó)產(chǎn)品牌也是不錯(cuò)的選擇, 因省去不少物流和報(bào)關(guān)費(fèi)用,與國(guó)外進(jìn)口試劑盒相比價(jià)格上有比較大的優(yōu)惠,而且能提供比較靈活的包裝規(guī)格, 如48tests小包裝,非常適合中國(guó)國(guó)情。國(guó)內(nèi)ELISA品牌靠譜的還是有4到5家,這里就不做硬廣告了,實(shí)驗(yàn)君可以上丁香通、小木蟲(chóng)等行業(yè)資訊平臺(tái)或論壇等了解。

  七、認(rèn)清訂購(gòu)渠道

  不論是國(guó)際還是國(guó)內(nèi)品牌,都需要在訂購(gòu)前先與生產(chǎn)廠商詳細(xì)溝通產(chǎn)品細(xì)節(jié)(比如酶標(biāo)板是否可拆卸),了解售前售后技術(shù)服務(wù)能力等。然后咨詢(xún)其訂購(gòu)渠道,比如直接向廠家訂購(gòu)或通過(guò)中國(guó)區(qū)或省級(jí)授權(quán)代理商經(jīng)銷(xiāo)商訂購(gòu)。謹(jǐn)防jia冒產(chǎn)品,花了錢(qián)是小事,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性、真實(shí)性是大事呀,耽誤了時(shí)間延遲了畢業(yè)更是不無(wú)處訴苦! 空留傷心淚。選擇正規(guī)渠道,選擇品質(zhì)!早發(fā)高質(zhì)量Paper!

  ELISA試劑盒在使用時(shí)如何選擇?古朵一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司始終秉承信譽(yù)為生存之本的宗旨,以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng),較大限度的滿(mǎn)足客戶(hù)的需求。與客戶(hù)的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo)。古朵!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作,共創(chuàng)美好的未來(lái)。


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