標(biāo)簽：白介素3 ELISA試劑盒 古朵生物

　　兔子白介素3(IL-3)ELISA試劑盒操作步驟及使用注意事項

　　中文名：兔子白介素3(IL-3)ELISA試劑盒

　　中文別名：兔子白介素3(IL-3)ELISA Kit

　　規(guī)格：48t/96t

　　保存：2-8℃

　　有效期：6個月

　　特點：敏感性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好、試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便。

　　用途：用于測定血清，血漿及相關(guān)液體樣本中相關(guān)含量或活性。

　　ELISA試劑盒種屬：人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、豬犬、牛羊、雞鴨、植物ELISA試劑盒等。

　　試劑盒檢測目的：用于測定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。

　　適用范圍：僅用于科研實驗，禁用于臨床。

　　兔子白介素3(IL-3)ELISA試劑盒操作步驟

　　操作步驟：

　　1、待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。?

　　2、酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。

　　3、洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后，即甩去)，之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。

　　4、陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。?

　　5、酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。?

　　6、洗板，同(4)。?

　　7、每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。?

　　8、酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。?

　　9、洗板，同(4)。?

　　10、每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。?

　　11、每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。?

　　12、分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，zui終測得的OD值為兩者之差(W1-W2)，以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

　　13、數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。

　　兔子白介素3(IL-3)ELISA試劑盒注意事項：

　　1、在收集標(biāo)本前都必須有一個完整的計劃，必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。

　　2、建議新鮮標(biāo)本收集后盡早檢測。1-3天左右檢測的樣本可儲存在4℃?zhèn)溆?。如有特殊原因需要周期性收集?biāo)本，請將標(biāo)本及時分裝后放在-20℃或- 70℃條件下保存，避免反復(fù)凍融。

　　3、當(dāng)混合蛋白溶液時應(yīng)盡量輕緩，避免起泡。

　　4、洗滌過程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽性。

　　5、一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)。

　　6、請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。

　　7、如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)。

　　8、在配制標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液工作液時，請以相應(yīng)的稀釋液配制，不能混淆。

　　9、底物請避光保存。

　　10、不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。

　　性能優(yōu)點：

　　1、、靈敏、特異的抗體;

　　2、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;

　　3、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體;

　　4、適用血清，血漿，組織勻漿液，細(xì)胞培養(yǎng)上清液，尿液等等多種標(biāo)本類型。

　　實驗原理：

　　采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。

　　標(biāo)本的處理：

　　1、細(xì)胞培養(yǎng)上清液

　　根據(jù)需要用試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)稀釋液稀釋樣品，然后按照說明書所述方法檢測。推薦稀釋濃度是稀釋5倍。

　　2、腦脊液

　　根據(jù)需要用試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)稀釋液稀釋樣品，然后按照說明書所述方法檢測。推薦稀釋濃度是5倍。

　　3、血漿

　　a、用EDTA2K離心收集在真空血液收集管中的血液，5,000×g，15分鐘，4℃，分離血漿樣品，然后儲存在零下80℃直到使用。

　　b、用試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)稀釋液126倍稀釋血漿以避免血漿中的干擾物質(zhì)影響檢測，按照說明書方法檢測。

　　兔子白介素3(IL-3)ELISA試劑盒操作步驟及使用注意事項 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品，勵志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司，產(chǎn)品遠(yuǎn)銷多個國家和地區(qū)，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經(jīng)營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準(zhǔn)則、以市場需求為導(dǎo)向，不斷開發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品，提供客戶滿意的綜合服務(wù)質(zhì)量"的方針。