對(duì)于轉(zhuǎn)染試劑，您了解多少?

　　關(guān)鍵詞：轉(zhuǎn)染試劑 古朵生物 免疫熒光試劑盒 基因轉(zhuǎn)染技術(shù)

　　轉(zhuǎn)染(transfection)指真核細(xì)胞由于外源DNA摻入而獲得新的遺傳標(biāo)志的過(guò)程。DNA轉(zhuǎn)染技術(shù)的發(fā)展對(duì)現(xiàn)代分子生物學(xué)產(chǎn)生了巨大的影響。

　　基因轉(zhuǎn)染技術(shù)不僅是研究轉(zhuǎn)基因和基因表達(dá)的重要工具，而且是目前基因治療的關(guān)鍵步驟。理想的基因轉(zhuǎn)染試劑應(yīng)該具有如下特點(diǎn):高效轉(zhuǎn)染;安全;低細(xì)胞毒性;方法簡(jiǎn)單;省時(shí)、經(jīng)濟(jì)。

　　哺乳動(dòng)物的轉(zhuǎn)染技術(shù)在60年代末70年代初即已引入。

　　目前，將外源DNA 導(dǎo)入哺乳動(dòng)物細(xì)胞的方法大致可分為兩大類，即生物方法和物理化學(xué)方法。物理化學(xué)方法中常用的有磷酸鈣法、顯微注射、電穿孔、脂質(zhì)體介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染，以及最近出現(xiàn)的以高分子聚合物為載體的基因傳遞技術(shù)。

　　生物方法則主要是以病毒作為載體,通過(guò)病毒感染的方式將外源DNA 導(dǎo)入到細(xì)胞中, 其中以逆轉(zhuǎn)錄病毒及腺病毒轉(zhuǎn)染系統(tǒng)尤為常用。

　　其中病毒載體的特點(diǎn)是整和效率高, 可使外源基因在宿主細(xì)胞中長(zhǎng)期表達(dá)，缺點(diǎn)是存在潛在的安全危險(xiǎn)性。電穿孔法及顯微注射法的特點(diǎn)是轉(zhuǎn)染率較高，缺點(diǎn)是需要昂貴的儀器，前者對(duì)細(xì)胞的損傷較大，后者在導(dǎo)入DNA 時(shí)需要一個(gè)細(xì)胞一個(gè)細(xì)胞地注射，不適合大量細(xì)胞研究的需要。

　　磷酸鈣在良好的轉(zhuǎn)染條件下，可以在293T等細(xì)胞的轉(zhuǎn)染達(dá)到較高的轉(zhuǎn)染效率。但磷酸鈣轉(zhuǎn)染有一個(gè)突出的問(wèn)題，非常不穩(wěn)定，尤其受PH值的影響非常大，在實(shí)驗(yàn)中使用的每種試劑都必須小心校準(zhǔn)，保證質(zhì)量，因?yàn)樯踔疗x*條件十分之一個(gè)PH都可能導(dǎo)致磷酸鈣轉(zhuǎn)染的失敗，經(jīng)常即使最熟練的轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)者也不能保證磷酸鈣轉(zhuǎn)染的成功，他們可能經(jīng)常為莫名其妙的轉(zhuǎn)染失敗而沮喪。

　　同時(shí)，他們還經(jīng)常發(fā)現(xiàn)，往往小體積的轉(zhuǎn)染比如6孔板以下的轉(zhuǎn)染效果比較理想，可一換到大皿，經(jīng)常轉(zhuǎn)染效率下降很快。磷酸鈣的先天缺陷往往是實(shí)驗(yàn)梗阻的主要原因。