在我們?nèi)粘５募?xì)胞實(shí)驗(yàn)中，總會遇到各式各樣的問題，其中關(guān)于胎牛血清(FBS)的問題最多，今天為大家匯總了血清一些常見問題，滿滿的干貨！
那些可以忽略的小卻重要的細(xì)節(jié)：
1. 血清的保存溫度？
未拆封的血清應(yīng)保存在-15℃至-20℃，避免反復(fù)凍融。拆封后的血清應(yīng)無菌分裝成適當(dāng)?shù)挠昧坎⒋娣庞?-15 ℃ 至 -20 ℃，2~8 ℃ 溶解后建議一個月內(nèi)使用。
2. 血清的有效期是多久？
大部分血清效期是 5 年，針對每個批次，請通過質(zhì)檢文件確定具體效期日期。
3. 血清應(yīng)如何融解？
血清從冷凍箱取出后，置于2～8℃冰箱使之融解，不時(shí)規(guī)則地?fù)u晃均勻，充分融解后分裝或使用。
4. 為什么有時(shí)血清中出現(xiàn)沉淀？是否需要去除？如何去除？
血清中的白色沉淀主要是脂蛋白、冷凝集素、玻連蛋白、胎球蛋白、磷酸鈣、膽固醇等、絮狀沉淀物主要是纖維蛋白。多種原因可能導(dǎo)致血清中沉淀的形成，最常見的原因之一是融化過程中，脂蛋白聚集所致。該現(xiàn)象一般不會影響產(chǎn)品質(zhì)量。若需要去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi)，以400g 稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。我們不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因?yàn)檠逯械男鯛钗飼枞^濾膜。
5. 血清是否需要做滅活處理？
血清是否需要滅活取決于您的應(yīng)用。加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。激活的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件，刺激平滑肌收縮，細(xì)胞和血小板釋放組胺，激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。在免疫學(xué)研究，培養(yǎng)ES 細(xì)胞，昆蟲細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時(shí)，推薦使用熱滅活血清。
滅活過程中，會導(dǎo)致血清中某些成分被破壞，如氨基酸，維生素，生長因子等。所以只有在您的實(shí)驗(yàn)對血清有特殊要求時(shí)，才會考慮對血清進(jìn)行滅活處理。如您的實(shí)驗(yàn)對血清中的某種組分敏感，需要去除該組分。最常見的情況是需要去除血清中的補(bǔ)體蛋白，因?yàn)檠a(bǔ)體在機(jī)體中參與細(xì)胞殺傷，巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞活化，肥大細(xì)胞和血小板組胺釋放，平滑肌收縮等過程，所以一般在免疫學(xué)相關(guān)研究中及肌細(xì)胞和干細(xì)胞的培養(yǎng)過程中需要對血清進(jìn)行滅活處理。
6. 如何進(jìn)行血清滅活處理？
血清請先按上述「血清應(yīng)如何融解」中的操作步驟融化和混勻，熱滅活時(shí)請將血清置于 56 ℃ 水浴 30 分鐘。為盡量減少熱滅活對血清品質(zhì)的影響，一次滅活的血清體積不宜過大。最好準(zhǔn)備同樣的容器裝相等體積的水(與血清相同溫度)，滅活時(shí)將裝有血清和水的容器同時(shí)放入 56 ℃ 水浴, 在裝水的容器中放置溫度計(jì)，加熱過程中不時(shí)輕輕旋轉(zhuǎn)混勻血清，當(dāng)溫度計(jì)顯示達(dá)到 56 ℃ 左右，開始計(jì)時(shí)。56 ℃ 水浴后，建議馬上轉(zhuǎn)移到冰上降溫。
