一、潔凈間擺放的儀器
(一)提供細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境的儀器
l.CO2培養(yǎng)箱
指能精密控制并提供恒溫、恒濕、潔凈、恒定CO2濃度的儀器，利用該儀器可使用培養(yǎng)皿、多孔板((6-96孔板)、培養(yǎng)方瓶等進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。
根據(jù)容積大小，有60-190L臺(tái)式，也有上下堆疊落地式。
根據(jù)通氣狀況，一般通CO2和空氣，也有3氣(CO2、N2和空氣)或4氣(CO2、NZ2、O2和空氣)培養(yǎng)箱。
根據(jù)控溫類(lèi)型，區(qū)分為水套式和氣套式兩種。
2.細(xì)胞工廠
在CO2培養(yǎng)箱中，應(yīng)用特定的培養(yǎng)容器進(jìn)行細(xì)胞大量培養(yǎng)。
3.滾瓶培養(yǎng)
(1)滾瓶培養(yǎng)箱放置于CO2培養(yǎng)箱中使用，有驅(qū)動(dòng)滾瓶滾動(dòng)的機(jī)械裝置，可以應(yīng)用滾瓶進(jìn)行細(xì)胞大量培養(yǎng)。
(2)滾瓶培養(yǎng)架在CO2濃度、溫度、濕度可控的潔凈間內(nèi)使用，有驅(qū)動(dòng)滾瓶滾動(dòng)的機(jī)械裝置，可以應(yīng)用滾瓶進(jìn)行細(xì)胞大量培養(yǎng)。
4.生物反應(yīng)器
生物反應(yīng)器，也稱動(dòng)物細(xì)胞罐，應(yīng)具有良好的無(wú)菌控制，通過(guò)專門(mén)的控制器組件進(jìn)行細(xì)胞大量培養(yǎng)，一般需要4氣(CO2、N2、O2和空氣)培養(yǎng)，可分批次培養(yǎng)和連續(xù)培養(yǎng)形式。
需要配置專門(mén)的補(bǔ)料瓶。培養(yǎng)工藝復(fù)雜，儀器設(shè)備的造價(jià)往往很高，通常用于研究、中試和生產(chǎn)。
根據(jù)罐體容量和培養(yǎng)容量(培養(yǎng)容量往往比罐體容量小)區(qū)別大小。一般在研究實(shí)驗(yàn)室使用的生物反應(yīng)器的罐體體積常在30L以下，用于生物制品制備的生物反應(yīng)器體積達(dá)到500L以上。罐體可以是鋼化玻璃、陶瓷，也可以是不銹鋼或欽合金或鐵。
(二)用于換液操作的儀器
1.微量移液器
微量移液器是常用的無(wú)菌操作移液用儀器，有單通道、8通道和12通道等規(guī)格。常見(jiàn)的種類(lèi)如下：
(1)50-200μl單道微量移液器，配套200μl無(wú)菌塑料吸嘴使用。
(2)50-300μl8道微量移液器，配套300μ1無(wú)菌塑料吸嘴使用。
(3)500-5000μ1微量移液器，配套5000μ1無(wú)菌塑料吸嘴使用。
(4)電動(dòng)大量移液器，配合無(wú)菌長(zhǎng)絲滴管、無(wú)菌刻度移液管使用，移液速度可調(diào)。
(三)鏡檢與顯微影像記錄儀器
1.倒置顯微鏡和倒置熒光顯微鏡
與正置顯微鏡(普通顯微鏡)的主要區(qū)別在于，倒置顯微鏡是載物臺(tái)在光源下方，或者說(shuō)物鏡在載物臺(tái)下方的顯微鏡，使得物鏡鏡頭與培養(yǎng)物液層下方的距離最短。
倒置熒光顯微鏡是帶有紫外光源(熒光激發(fā)光源)的倒置顯微鏡。
倒置顯微鏡和倒置熒光顯微鏡都分別比同品質(zhì)的正置顯微鏡(普通顯微鏡)和正置熒光顯微鏡(普通熒光顯微鏡造價(jià)高出10倍以上。倒置顯微鏡和倒置熒光顯微鏡往往屬于三目顯微鏡(指除了裝配有2個(gè)普通目鏡外，尚有接駁顯微攝影的目鏡)。
2.顯微攝影系統(tǒng)
指通過(guò)接圈與顯微鏡三目接頭相連，借助配套的專業(yè)PC軟件獲得顯微影像并能進(jìn)行處理的裝置。
3.細(xì)胞計(jì)數(shù)器材
細(xì)胞計(jì)數(shù)常用的是血細(xì)胞計(jì)數(shù)板或細(xì)胞計(jì)數(shù)儀。
細(xì)胞計(jì)數(shù)儀價(jià)格昂貴，如invitrogen的Countess自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀。
一般地，血細(xì)胞計(jì)數(shù)板并不屬于儀器，單價(jià)數(shù)十至數(shù)百元。但是，血細(xì)胞計(jì)數(shù)板有計(jì)量許可，計(jì)數(shù)窗有玻璃刻畫(huà)線，與配套的蓋玻片一起使用。有2個(gè)計(jì)數(shù)窗，每個(gè)計(jì)數(shù)窗使用有4-5個(gè)計(jì)數(shù)大格。細(xì)胞密度/ml=計(jì)數(shù)窗內(nèi)大格的平均細(xì)胞數(shù)×104/ml。
(四)無(wú)菌操作依賴的儀器
無(wú)菌操作的區(qū)域主要是在潔凈間內(nèi)的超凈工作臺(tái)內(nèi)完成的。
1.空氣凈化器
使?jié)崈糸g內(nèi)空氣按要求進(jìn)行除塵、紫外消毒滅菌、循環(huán)。
2.潔凈間換氣裝置
使?jié)崈糸g外新鮮空氣經(jīng)過(guò)初效和高效濾器濾過(guò)除塵后進(jìn)人室內(nèi)，并且把室內(nèi)含粉塵的不新鮮的空氣按要求排放到室外的裝置，一般設(shè)置有定時(shí)開(kāi)關(guān)，使每小時(shí)換氣達(dá)到一定的次數(shù)，保證潔凈間內(nèi)空氣潔凈度維持在某個(gè)級(jí)別以上。
3.超凈工作臺(tái)
超凈工作臺(tái)，也稱超凈工作臺(tái)或無(wú)菌工作臺(tái)。根據(jù)通過(guò)高效濾器送出風(fēng)的方向區(qū)分為垂直風(fēng)淋和水平風(fēng)淋兩種，風(fēng)速可調(diào)，內(nèi)置照明燈管和紫外燈管。垂直風(fēng)淋超凈工作臺(tái)常見(jiàn)的有單人雙面、雙人雙面、單人單面、雙人單面等規(guī)格。
(1)超凈工作臺(tái)使用步驟
①用前準(zhǔn)備：先用消毒抹布擦拭臺(tái)面干凈，整理臺(tái)面器材到臺(tái)面兩側(cè)，關(guān)閉兩側(cè)玻璃門(mén)，開(kāi)啟電源開(kāi)關(guān)，打開(kāi)風(fēng)淋，單獨(dú)打開(kāi)紫外燈照射30-40min再關(guān)閉；
?、谑褂脮r(shí)：操作者雙手(或戴手套)消毒，打開(kāi)照明燈，抬升玻璃門(mén)至合理高度，可點(diǎn)燃酒精燈以便輔助滅菌或消毒使用。由外部拿人的無(wú)菌操作物品需注意除塵處理(先在超凈工作臺(tái)外部拆解無(wú)菌物品的外包裝、用消毒酒精棉球擦拭存塵外表面等)；
?、凼褂煤螅杭皶r(shí)清理廢棄物和濺落物，移走用過(guò)的器材，擺放好臺(tái)面物品，并用消毒抹布或消毒酒精棉球擦拭臺(tái)面使干凈，關(guān)閉照明燈和側(cè)玻璃門(mén)，打開(kāi)紫外燈照射30-40min再關(guān)閉，然后關(guān)閉風(fēng)淋和總電源開(kāi)關(guān)。
(2)超凈工作臺(tái)使用注意事項(xiàng)
如果超凈工作臺(tái)電源、照明燈、紫外燈、風(fēng)淋等出現(xiàn)異常，需經(jīng)過(guò)調(diào)節(jié)使正常后方可使用。
操作者雙手在潔凈臺(tái)內(nèi)部分的穿著(穿戴潔凈服、乳膠手套，或無(wú)穿戴)必須符合無(wú)菌操作要求。
每次使用后用消毒液浸泡的濕抹布擦抹臺(tái)面粉塵，長(zhǎng)時(shí)間不使用超凈工作臺(tái)也應(yīng)定期用消毒液浸泡的濕抹布擦抹臺(tái)面粉塵。
定期擦抹照明燈管和紫外燈管上可能存在的微塵，以便保證充足的照明效果和充分的消毒滅菌效果。
二、試劑、培養(yǎng)用液及細(xì)胞材料處置用儀器
所涉及的一般試劑通常存放于輔助間柜子或潔凈間柜子。需要冷藏或凍存的生化試劑、血清、培養(yǎng)基、細(xì)胞材料等，需要區(qū)別對(duì)待，存放到對(duì)應(yīng)的儀器內(nèi)，以保證其活性和功能。
(一)用于生化試劑、培養(yǎng)用液存放的儀器
1.普通冰箱
存放培養(yǎng)用液的普通冰箱，通常放于潔凈間。
普通冰箱一般分為冷藏區(qū)和冷凍區(qū)，冷藏區(qū)的溫度一般調(diào)節(jié)到4℃左右，冷凍區(qū)的溫度一般最di能調(diào)節(jié)到-26℃。不能凍存的試劑和材料必須放冷藏區(qū)，可以凍存的試劑和材料最好放在冷凍區(qū)。
2.冰拒
冰柜分冷藏冰柜和冷凍冰柜?？纱罅看娣派镌噭┖筒牧?。
3.低溫冰箱
只有冷凍區(qū)，一般指低溫能控制到-50℃，高溫不超過(guò)0℃的冷凍用冰箱。用于長(zhǎng)期存放蛋白類(lèi)材料或試劑。
(二)細(xì)胞材料凍存用儀器
1.超低溫冰箱
一般指低溫能達(dá)到-50℃以下，如-70℃，或者-86℃的冷凍用冰箱。主要用于細(xì)胞株、細(xì)胞系或其他細(xì)胞材料如組織、胚胎等的短期保存。
2.液氮罐
液氮層內(nèi)的溫度為-196℃，有足夠液氮的液氮罐內(nèi)氣體部分的溫度可到-100℃以下。通常用于保存細(xì)胞株、細(xì)胞系或其他細(xì)胞材料如組織、胚胎等。
液氮會(huì)自動(dòng)升華，因此，根據(jù)實(shí)際消耗狀況，需及時(shí)地定期、定量地補(bǔ)充液氮。一般認(rèn)為液氮內(nèi)的細(xì)胞株、細(xì)胞系或其他細(xì)胞材料如組織、胚胎等可以實(shí)現(xiàn)yong久保存。
(三)培養(yǎng)用液升溫用儀器
一般需要準(zhǔn)備一臺(tái)恒溫水浴，用于培養(yǎng)用液從零上低溫到37℃的升溫。恒溫水浴使用時(shí)需加注純水以免產(chǎn)生水垢影響無(wú)菌操作。
