【實驗?zāi)康摹?br />1. 了解常規(guī)切片的制作過程。
2. 熟悉蘇木素－伊紅（hematoxylin and eosin，HE）染色方法。

【實驗原理】
將各種方法（活檢、尸檢）獲取的組織標本經(jīng)過一定的步驟處理，做成切片。蘇木素是堿性染料，可將細胞核（嗜堿性物質(zhì)）染成藍色，伊紅是酸性染料，可將多數(shù)細胞的細胞質(zhì)（嗜酸性物質(zhì)）染成紅色，形成色彩鮮艷、結(jié)構(gòu)清晰的組織圖像。

【實驗對象】
尸檢來源的正常肺組織。

【實驗藥品與器材】
1. 器材 手術(shù)刀、恒溫箱、石蠟切片機、顯微鏡。
2. 試劑 10％福爾馬林，梯度酒精（70％、80％、90％、95％），*，二甲苯，包埋石蠟，蘇木素染液，伊紅染液。

【實驗方法與步驟】
1. 取材和固定 用鋒銳的手術(shù)刀細致而迅速地取下一塊大小適宜（1.5×1.5×0.2 cm）的肺組織塊，立即投入10％福爾馬林內(nèi)固定24 h，也可多放一段時間待用時取出（hao不要超過48h）。
2. 脫水 依次經(jīng)過70％（2 h）、80％（2 h）、90％（2 h）、95％酒精（Ⅰ、Ⅱ 各2 h）和*（Ⅰ、Ⅱ各1 h）脫水，二甲苯透明（Ⅰ、Ⅱ 各1 h），以置換組織內(nèi)的酒精溶液。
3. 包埋 將透明好的組織塊置入已在溫箱（58℃～60℃）內(nèi)熔化的石蠟內(nèi)（Ⅰ、Ⅱ 各2 h），使石蠟浸入組織并替換出二甲苯。在包埋器的內(nèi)壁涂一層甘油，傾入熔化的石蠟，將浸透蠟的組織塊放入包埋器（待切面朝下），擺好間距和方位，待蠟液表面凝固后，將包埋器投入冷水浴中，使石蠟冷卻凝固。
4. 切片 將蠟塊固定于切片機，切成5μm厚的切片，在45℃的水面上展平后撈在涂有防脫劑的載玻片上，置60℃烤箱2h。
5. 脫蠟 二甲苯脫蠟（Ⅰ、Ⅱ 各15min），不同濃度酒精（100％、95％、80％、70％）置換二甲苯并經(jīng)蒸餾水水化后即可進行染色。
6. 蘇木精－伊紅染色 將經(jīng)處理的組織切片置蘇木素染液中染5min，自來水沖洗，稀鹽酸分化后，置流水中充分沖洗返藍；伊紅染液染色2～3min，流水沖洗干凈。
7. 脫水、透明和封固 染好的切片經(jīng)梯度酒精脫水（70％、80％、95％、100％）各5min，二甲苯透明（Ⅰ、Ⅱ 各5 min），在載玻片上加一滴中性樹膠，然后覆蓋一片清潔的蓋玻片。
8. 顯微鏡觀察。

【注意事項】
1. 每取完一例標本后，所有的工具如刀、剪、盤、鑷、切板等，必須用水沖洗干凈，以免污染。
2. 盡量保持組織的原有形態(tài)，勿使組織塊受擠壓，切取標本的大小不超過2.0 cm×2.0 cm×0.2 cm。
3. 依據(jù)組織塊大小確定脫水、透明和浸蠟時間。時間過長，組織塊過硬、變脆；時間不夠，則組織塊硬度不夠，且HE染色時核漿藍染，界限不清，不利于觀察。
4. 蘇木素染后應(yīng)充分返藍，使細胞色彩鮮明，結(jié)構(gòu)清晰。