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豬*（Cortisol）ELISA試劑盒說明書
閱讀：89 發(fā)布時間：2019-7-25豬*(Cortisol)ELISA試劑盒
英文簡稱：Pig cortisol (Cortisol) ELISA kit
產(chǎn)品貨號：KS11220
品牌名稱：科順生物
產(chǎn)品規(guī)格：96T/48T
運輸方式：快遞(根據(jù)客戶要求，選擇具體的運輸方式)
產(chǎn)品價格：*，歡迎在線留言洽談！
使用范圍：僅供科研檢測,不得用于臨床.
豬*(Cortisol)ELISA試劑盒實驗原理：
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中小鼠胰島素（INS）水平。用純化的小鼠胰島素（INS）捕獲抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被的微孔中依次加入小鼠胰島素（INS），再與HRP標記的檢測抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠胰島素（INS）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中小鼠胰島素（INS）含量。
豬*(Cortisol)ELISA試劑盒組成：
試劑盒組成 48孔配置 96孔配置 保存
說明書 1份 1份
封板膜 2片 2片
密封袋 1個 1個
酶標包被板 1×48 1×96 2-8℃保存
標準品 0.3ml×6管 0.3ml×6管 2-8℃保存
酶標試劑 5 ml×1瓶 10 ml×1瓶 2-8℃保存
樣品稀釋液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
顯色劑A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
顯色劑B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
終止液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
20×濃縮洗滌液 15ml×1瓶 25ml×1瓶 2-8℃保存
注：標準品濃度依次為：40、20、10、5、2.5、0 mIU/L.
豬*(Cortisol)ELISA試劑盒樣本處理及要求：
1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。
2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。
3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
豬*(Cortisol)ELISA試劑盒操作步驟
1.標準品的加樣：設(shè)置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；。
2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3.加酶：每孔加入酶標試劑100μl，空白孔除外。
4.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。
5.配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
6.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
7.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
8.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
9.測定：以空白孔調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
豬*(Cortisol)ELISA試劑盒注意事項：
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。
3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間zuei好控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4．請每次測定的同時做標準曲線，zuei好做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物請避光保存。
7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。
計算：
以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，
在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD
值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋
倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標
準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值
代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋
倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。
豬*(Cortisol)ELISA試劑盒相關(guān)產(chǎn)品:
KS17751 豬心鈉肽(ANP)ELISA試劑盒
KS17965 豬心型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP3)ELISA試劑盒
KS17750 豬心型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP3/FABP11/MDGI)ELISA試劑盒
KS17749 豬*β4(Thymosinβ4)ELISA試劑盒
KS17748 豬旋毛蟲IgG抗體(TrichinellaIgGAb)ELISA試劑盒
KS17747 豬血管活性腸肽(VIP)ELISA試劑盒
KS18169 豬血管緊張素Ⅱ(ANGⅡ)ELISA試劑盒
KS11927 豬血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒
KS13564 豬血管緊張素I(ANGI)ELISA試劑盒
KS17746 豬血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA試劑盒
KS17745 豬血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)ELISA試劑盒
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KS17744 豬血管內(nèi)皮鈣粘著蛋白復(fù)合體(VEcad)ELISA試劑盒
KS17963 豬血管內(nèi)皮生長因子A(VEGFA)ELISA試劑盒
KS17962 豬血管內(nèi)皮生長因子受體1(VEGFR1)ELISA試劑盒
KS17961 豬血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR2)ELISA試劑盒
KS17960 豬血管內(nèi)皮細胞蛋白C受體(PROCR)ELISA試劑盒
KS17743 豬血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒
KS17742 豬血管內(nèi)皮細胞粘附分子1(VCAM1)ELISA試劑盒
KS11749 豬血管內(nèi)皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒
KS10618 豬血管生成素1(ANG-1)ELISA試劑盒
KS17959 豬血管生成素1(ANGPT1)ELISA試劑盒
KS12897 豬血管生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒
KS17958 豬血管生成素2(ANGPT2)ELISA試劑盒
KS17741 豬血管生成素受體/含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域*激酶2(Tie2)ELISA試劑盒
KS11878 豬血管生成素受體Tie2(ANG-R-Tie2)ELISA試劑盒
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KS11663 豬血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA試劑盒
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KS17738 豬血漿*(KLKS1)ELISA試劑盒
KS17737 豬血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒
KS12607 豬血清一氧化氮(NO)ELISA試劑盒