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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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更新時(shí)間:2018-04-20 12:49:11瀏覽次數(shù):150次
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雜交瘤細(xì)胞;1F2品牌冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時(shí),以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
細(xì)胞名稱 雜交瘤細(xì)胞;1F2品牌
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供雜交瘤細(xì)胞;1F2品牌的報(bào)價(jià),咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購。
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時(shí),以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時(shí)和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請拍下照片及時(shí)和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
Anti-ICAM-1(CD54)/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞間粘附分子-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-PKC beta1/2/FITC 熒光素標(biāo)記蛋白激酶C beta抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ARTS 凋亡相關(guān)蛋白TGFb信號抗體 規(guī)格 0.2ml
Donkey Anti-rabbit IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的驢抗兔IgG 0.1ml
GCM2 英文名稱: 絨毛膜特異性轉(zhuǎn)錄因子GCM2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Monkey IgM 兔抗猴IgM 規(guī)格 1mg
Anti-PKC beta1/2/FITC 熒光素標(biāo)記蛋白激酶C beta抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
ANF(Human atrial natriuretic factor) ELISA Kit 人心納素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-HADHSC (rat, mouse) 短鏈L-3羥烷基*脫氫酶抗體(大鼠,小鼠)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh MLN/Motilin 胃動素抗體 規(guī)格 0.1ml
HD(Human Histone Deacetylase) ELISA Kit 人組織蛋白去乙?;?96T
RPH3AL 英文名稱: Ras相關(guān)GTP結(jié)合蛋白抗體 0.2ml
CDCA4 英文名稱: 細(xì)胞分裂周期相關(guān)蛋白4抗體 0.1ml
Anti-HADHSC (rat, mouse) 短鏈L-3羥烷基*脫氫酶抗體(大鼠,小鼠)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-CD167a(DDR1)/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記CD167a抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
ECE1(Endothelin Converting Enzyme 1) 內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
ADP核糖基化因子相互作用蛋白1抗體 Anti-Arfaptin 1 0.1ml
ZNF146 英文名稱: 鋅指蛋白146抗體 0.2ml
DHFR 英文名稱: 二氫*還原酶抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-eIF4EBP1/4EBP1(Ser65/Thr70) 磷酸化eIF4E結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
ECE1(Endothelin Converting Enzyme 1) 內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-E.coli O139/Gold 膠體金離子標(biāo)記抗志賀毒素大腸桿菌O139抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-Metronidazole/FITC 熒光素標(biāo)記抗*抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh C6orf192 8號染色體開放閱讀框192抗體 規(guī)格 0.2ml
CD62L (ELAM-1/L-Selectin ) L選擇素抗原 0.5mg
HN1L 英文名稱: 雄激素調(diào)節(jié)樣蛋白抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh SCNN1B/βENaC 上皮鈉通道β抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-Metronidazole/FITC 熒光素標(biāo)記抗*抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
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