小鼠20S-蛋白酶體elisa檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)原理：
本試劑盒采用競(jìng)爭(zhēng)法檢測(cè)樣本中小鼠20S-蛋白酶體(20S-PSM)的含量。向預(yù)先包被了抗體的酶標(biāo)孔中加入樣本，再加入*標(biāo)記的識(shí)別抗原，在37℃下孵育30min，兩者與固相抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合形成免疫復(fù)合物，經(jīng)PBST洗滌除去未結(jié)合的*抗原，然后加入親和素-HRP，在37℃下孵育30min,親和素-HRP與*抗原結(jié)合，洗滌后結(jié)合的HRP催化TMB（四甲基聯(lián)苯胺）成藍(lán)色，隨后在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色，在450nm波長(zhǎng)下有吸收峰，吸光值與樣本中抗原的濃度成負(fù)相關(guān)。
小鼠20S-蛋白酶體elisa檢測(cè)試劑盒操作步驟：
1、加樣：分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50µl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40µl，然后再加待測(cè)樣品10µl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
2、溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育30分鐘。
3、配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
4、洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
5、加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50µl，空白孔除外。
6、顯色：每孔先加入顯色劑A50µl，再加入顯色劑B50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
10 分鐘.
7、終止：每孔加終止液50µl，終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
8、測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。100U2～8℃
elisa檢測(cè)試劑盒
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