今天給大家介紹一款熒光法雙鏈DNA檢測工具—Pico488 dsDNA定量試劑盒（B1102），以及單獨(dú)的Pico488 dsDNA 定量試劑（42010），Pico488是一種極為靈敏的熒光核酸染料，常用于雙鏈DNA的定量檢測。歷來DNA濃度的測定在cDNA文庫的構(gòu)建，DNA亞克隆、PCR產(chǎn)物的估測等領(lǐng)域中具有重要意義，疫苗等生物制品中殘留微量DNA的檢測更是直接關(guān)系到人類的健康。

Pico488僅在與DNA雙鏈結(jié)合后才發(fā)出熒光，且所產(chǎn)生的熒光與DNA濃度呈正比，在存在ssDNA、RNA和單體核苷酸的條件下，可以選擇性地檢測低至pg級別的dsDNA。該分析在三個(gè)數(shù)量級范圍內(nèi)呈線性，且?guī)缀鯚o序列依賴性，可以精確地測量多個(gè)來源的DNA，包括基因組DNA、病毒DNA、小量提取DNA或PCR擴(kuò)增產(chǎn)物，可用熒光分光光度計(jì)或熒光酶標(biāo)儀讀數(shù)，Ex/Em=503nm/525nm。

艾美捷B1102 Pico488-dsDNA定量試劑盒，用于在存在RNA、蛋白質(zhì)和常見污染物的情況下定量測量樣品中的雙鏈DNA。Pico488允許對低至pg/mL的dsDNA進(jìn)行定量。DNA濃度測量的線性范圍為1 pg/μL–5 ng/μL，因此該試劑盒的靈敏度可評定為超高（UHS）。

Pico488-dsDNA定量試劑盒包含用于測量的Pico488染料、緩沖液和DNA標(biāo)準(zhǔn)。它與熒光計(jì)、熒光板讀數(shù)器、反應(yīng)杯和微量熒光計(jì)兼容。

相比傳統(tǒng)的方法，如紫外吸光法（A260）、探針雜交法、Hoechst 33258染料法等，Pico488 dsDNA 定量具有以下優(yōu)勢：

①靈敏度高：數(shù)量級較UV吸光讀數(shù)更敏感，檢測范圍為：1pg/ul–5ng/ul，可節(jié)省寶貴的樣品；

②特異性強(qiáng)：在等摩爾的RNA存在的條件下，對dsDNA具有特異性；

③耐受性好：耐受較高濃度的鹽、尿素、乙醇、氯仿、去垢劑、蛋白或瓊脂糖，可以直接定量PCR擴(kuò)增產(chǎn)物而無需從反應(yīng)混合物中純化DNA；

④易于使用：只需在樣品中加入染料，等待5分鐘，然后讀數(shù)即可，且適用于24和96孔板；與市面上的大多數(shù)熒光酶標(biāo)儀和熒光計(jì)兼容；

⑤適用范圍廣：可適用于PCR的分析、芯片樣品、DNA損傷分析、酶活性分析、基因組DNA定量以及復(fù)雜混合物中dsDNA的檢測和病毒DNA定量等多種領(lǐng)域。

Pico488-dsDNA定量試劑盒引用文獻(xiàn)賞析：

1.Caza, F.; Granger Joly de Boissel, P.; Villemur, R.; Betoulle, S.; St-Pierre, Y. Liquid biopsies for omics-based analysis in sentinel mussels. PLoS One, 2019, 14(10), e0223525. doi: 10.1371/journal.pone.0223525

2.Crupi, A.N.; Nunnelee, J.S.; Taylor, D.J.; Thomas, A.; Vit, J.-P.; Riera, C.E.; Gottlieb, R.A.; Goodridge, H.S. Oxidative muscles have better mitochondrial homeostasis than glycolytic muscles throughout life and maintain mitochondrial function during aging. Aging, 2018, 10(11), 3327–3352. doi: 10.18632/aging.101643