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大鼠高靈敏C-反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒研究方案

時間:2022-12-30閱讀:44
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C反應(yīng)蛋白(CRP)是在血漿中發(fā)現(xiàn)的一種環(huán)狀(環(huán)狀)五聚體蛋白,其循環(huán)濃度隨炎癥反應(yīng)而升高。它是肝起源的急性期蛋白,在巨噬細胞和T細胞分泌白介素6后增加。它的生理作用是與死細胞或垂死細胞(和某些類型的細菌)表面表達的溶血磷脂酰膽-堿結(jié)合,以通過C1q激活補體系統(tǒng)。

 

肝臟響應(yīng)巨噬細胞和脂肪細胞(脂肪細胞)釋放的因子而合成CRP。它是pentraxin蛋白質(zhì)家族的成員。它與C肽(胰島素)或C蛋白(凝血)無關(guān)。C反應(yīng)蛋白是xxx個被識別的模式識別受體(PRR)。

 

C反應(yīng)蛋白的功能

C反應(yīng)蛋白與死細胞或垂死細胞和某些細菌表面表達的磷酸膽-堿結(jié)合。這會激活補體系統(tǒng),促進巨噬細胞的吞噬作用,從而清除壞死和凋亡的細胞和細菌。

 

這種所謂的急性期反應(yīng)是由于巨噬細胞和脂肪細胞產(chǎn)生的IL-6濃度升高而引起的,該濃度是對各種急性和慢性炎癥條件(例如細菌、病毒或真菌感染;風濕病和其他炎性疾?。粣盒砸约敖M織損傷和壞死。這些情況導(dǎo)致白介素6和其他細胞因子的釋放,觸發(fā)肝臟合成CRP和纖維蛋白原。

 

C反應(yīng)蛋白與微生物上的磷酸膽-堿結(jié)合。人們認為它有助于補體與外源和受損細胞的結(jié)合,并增強巨噬細胞的吞噬作用(調(diào)理素介導(dǎo)的吞噬作用),巨噬細胞表達CRP受體。它在先天免疫中起著抵抗感染的早期防御系統(tǒng)的作用。

 

艾美捷C-反應(yīng)蛋白(CRPELISA試劑盒是一種高度靈敏的雙位點酶聯(lián)免疫分析(ELISA),用于定量測定各種屬生物樣品中的CRP。僅供研究使用。

 

以大鼠高度敏感CRP酶聯(lián)免疫吸附試驗為例:

預(yù)期用途:

大鼠高靈敏C-反應(yīng)蛋白(CRPELISA試劑盒是一種高靈敏的雙位點酶聯(lián)免疫測定(ELISA),用于定量測定大鼠生物樣品中的C-反應(yīng)蛋白(CRP)。僅供研究使用。

 

艾美捷大鼠高靈敏C-反應(yīng)蛋白(CRPELISA試劑盒原則:

雙抗體夾心ELISA的原理如圖1所示。在該測定中樣品與吸附在聚苯乙烯微量滴定孔表面的抗CRP抗體反應(yīng)。之后通過洗滌去除未結(jié)合的蛋白質(zhì),結(jié)合辣根過氧化物酶(HRP)的抗-CRP抗體是補充。該HRP綴合的抗體與先前結(jié)合的CRP形成復(fù)合物。在另一洗滌步驟之后,通過添加顯色底物3,3',5,5'來測定與免疫吸附結(jié)合的酶-TMB。結(jié)合酶的數(shù)量與樣品中CRP的濃度成正比測試;因此,在450nm處的吸光度是測試樣品中CRP濃度的量度。數(shù)量測試樣品中的CRP可以從由校準品構(gòu)建的校準曲線中插值,并根據(jù)樣品稀釋。

 

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大鼠高靈敏C-反應(yīng)蛋白(CRPELISA劑盒組分:

1.一瓶含有50mL 5X濃縮稀釋液流動緩沖液。

2.一瓶含有50mL 20X濃縮洗滌液。

3.一個小瓶含有150µL100X濃縮親和純化抗大鼠CRP抗體,該抗體與HRP結(jié)合

穩(wěn)定緩沖液。

4.一瓶含有12mL TMB和過氧化氫的檸檬酸緩沖液(pH 3.3)。

5.一瓶含12 mL 0.3 M硫酸。避免接觸皮膚

6.12個可拆卸的八孔微條,位于孔支架框架內(nèi)??子糜H和純化的抗大鼠CRP包被。

7.一個裝有凍干大鼠CRP校準品的小瓶。

8.一小瓶含有50µL血清和0.1%化鈉。


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