喜-樹-堿（Camptothecin，CPT）為吡咯喹啉細(xì)胞毒性生物堿，是除紫-杉-醇之外研究最多的天然抗腫瘤藥物之一，存在于在我國*的珙桐科植物喜樹的果實(shí)或根中。《浙江民間常用草藥》中記載，喜樹的根皮具有清熱解毒，散結(jié)消腫之功效，果實(shí)具有活血化瘀之功效，常用來煎湯內(nèi)服或者是研末吞服，治療牛皮癬、瘡腫等癥狀。

1966年，美國國家癌癥研究所的Monreoe E. Wall 和Mansukh C. Wani 從原產(chǎn)于中國中部的喜樹樹皮和樹干中分離得到一種五環(huán)單萜生物堿，這是對(duì)喜-樹-堿的最早研究。

1967年到1970年，研究者發(fā)現(xiàn)該五環(huán)單萜生物堿在體外對(duì)Hela細(xì)胞（宮頸癌細(xì)胞的細(xì)胞系）、L1210細(xì)胞（小鼠淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞）及嚙齒類動(dòng)物顯示出較強(qiáng)的抗腫瘤活性，同時(shí)還表明對(duì)胃癌、直腸癌和白血病等多種惡性腫瘤均有一定的療效，這引發(fā)了科學(xué)界對(duì)植物喜樹和喜-樹-堿類化合物的研究熱潮，陸陸續(xù)續(xù)發(fā)現(xiàn)了更多的喜-樹-堿類化合物。但因多種原因，喜-樹-堿藥物的臨床應(yīng)用卻未取得有效推進(jìn)。

1985年，Hsiang和其同事發(fā)現(xiàn)喜-樹-堿及其衍生物是以拓?fù)洚悩?gòu)酶I（Topoisomerase I，Topo I）為靶點(diǎn)，通過TopoI-DNA可裂解復(fù)合物可逆結(jié)合，形成的CPT-Topo I-DNA三元復(fù)合物可抑制DNA的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄，進(jìn)而導(dǎo)致癌細(xì)胞的死亡。相比TopoII抑制劑，Topo I抑制劑療效高，抗瘤譜廣，喜-樹-堿對(duì)拓?fù)洚悩?gòu)酶I有專一抑制性，引發(fā)了新一輪的關(guān)注。

經(jīng)過多年的技術(shù)積累和發(fā)展，藥物遞送被廣泛應(yīng)用于抗腫瘤領(lǐng)域，提高藥物有效性，降低藥物毒性，改善藥物安全性。已有多種技術(shù)應(yīng)用于喜-樹-堿藥物的開發(fā)，例如脂質(zhì)體、抗體偶聯(lián)藥物、樹枝狀大分子、膠束等技術(shù)。

喜-樹-堿為不溶于酸不溶于水的中性生物堿，也很難溶于一般的有機(jī)溶劑。對(duì)光和熱敏感，光照會(huì)影響喜-樹-堿的吸光度，避光則保持穩(wěn)定，而加熱則會(huì)使喜-樹-堿分解。室溫下經(jīng)稀堿處理，容易開環(huán)成水溶性羧酸鹽，酸化則又重新內(nèi)酯化成環(huán)。

喜-樹-堿物化性質(zhì)：

中文名：喜-樹-堿

外文名：Camptothecin

別    名：(+)-喜-樹-堿

化學(xué)式：C20H16N2O4

分子量：348.34

CAS登錄號(hào)：7689-03-4

EINECS登錄號(hào)：444-280-6

熔    點(diǎn)：260 °C (dec.)(lit.)

沸    點(diǎn)：757.0±60.0 °C at 760 mmHg

水溶性：極難溶于水

外    觀：淺黃色針狀結(jié)晶

閃    點(diǎn)：411.6±32.9 °C

應(yīng)    用：抗癌藥

艾美捷喜-樹-堿是一種具有抗腫瘤特性的細(xì)胞毒性植物生物堿，是一種原型DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I抑制劑。在凋亡檢測實(shí)驗(yàn)中使用喜-樹-堿創(chuàng)建陽性對(duì)照。

艾美捷喜-樹-堿(Camptothecin)基本操作：

1、將喜-樹-堿粉末溶解在組織培養(yǎng)級(jí)DMSO中，以獲得2mg/mL喜-樹-堿儲(chǔ)備濃度。

2、制備50–100µL的DMSO增溶喜-樹-堿等分試樣，并將其冷凍保存在<-20°C。一瓶冷凍的喜-樹-堿可在丟棄前再解凍2次。應(yīng)標(biāo)記已解凍1X的小瓶，以表明這一點(diǎn)，以便它們在丟棄前只經(jīng)過一次解凍。

3、喜-樹-堿濃度范圍為2–4µg/mL的刺突細(xì)胞培養(yǎng)物，產(chǎn)生6–12µM的細(xì)胞培養(yǎng)物喜-樹-堿濃度。該喜-樹-堿濃度范圍適用于誘導(dǎo)Jurkat或HL 60細(xì)胞懸浮液，其濃度范圍通常為1 x 105–1 x 106細(xì)胞/mL。在此濃度范圍內(nèi)，培養(yǎng)4小時(shí)（37°C）后成功誘導(dǎo)凋亡。

4、對(duì)特定細(xì)胞系進(jìn)行時(shí)間歷程研究，以確定合適的喜-樹-堿濃度和暴露時(shí)間，從而為實(shí)驗(yàn)實(shí)現(xiàn)良好的凋亡誘導(dǎo)水平。

喜-樹-堿(Camptothecin)學(xué)術(shù)論文參考：

王洋，戴紹軍，閻秀峰.    光強(qiáng)對(duì)喜樹幼苗葉片次生代謝產(chǎn)物喜-樹-堿的影響． 《 CNKI;WanFang 》 ， 2004  

閻秀峰，王洋，于濤，張玉紅等.    喜樹葉中喜-樹-堿含量的高效液相色譜分析． 《 CNKI 》 ， 2002  

楊時(shí)成，朱家壁，梁秉文等.    喜-樹-堿固體脂質(zhì)納米粒的研究． 《 藥學(xué)學(xué)報(bào) 》 ， 1999  

劉鍵.    羥基喜-樹-堿類藥物作用機(jī)制及在合并治療中機(jī)理的研究． 《 中國腫瘤臨床 》 ， 1998  

張志榮，路偉.    肝靶向羥基喜-樹-堿緩釋毫微粒的研究． 《 CNKI 》 ， 1997