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蛋白酶K是一種從白色念珠菌分離出來(lái)的強(qiáng)力蛋白溶解酶,具有很高的比活性,是DNA提取的關(guān)鍵試劑。該酶在較廣的pH范圍(4?12.5)內(nèi)及高溫 (50?70°C)均有活性,用于質(zhì)?;蚧蚪M DNA、RNA的分離。在DNA提取中,主要作用是酶解與核酸結(jié)合的組蛋白,使 DNA游離在溶液中,隨后用不同方法進(jìn)行抽提,除去雜質(zhì),收集DNA。EDTA等螯合劑或SDS等去垢劑均不能使之失活。蛋白酶K貯存液一般為10mg/ml或20mg/ml。 貯存于-20°C。蛋白酶K溶液為無(wú)色透明,如出現(xiàn)沉淀就不能再使用。
艾美捷重組蛋白酶K是一種不含動(dòng)物源性物質(zhì)的(animal origin-free, AOF)的蛋白酶K,通過(guò)畢赤酵母(Pichia pastoris)發(fā)酵并純化獲得。
盡管鈣離子不影響酶的活性,但當(dāng)濃度為1-5μmol時(shí),它們確實(shí)有助于酶的穩(wěn)定性。蛋白酶K的一個(gè)有趣的特征是,它在十二烷基硫酸鈉(SDS)或尿素存在下保持活性。(0.5-1%SDS和1-4M尿素)。將反應(yīng)溫度從37℃提高到50℃-60℃可以將活性提高幾倍。蛋白酶K的一個(gè)特殊特征是其消化天然蛋白質(zhì)的能力,從而使酶如DNase和RNase失活,而無(wú)需借助變性過(guò)程。
艾美捷重組蛋白酶K,無(wú)動(dòng)物源/AF穩(wěn)定性/儲(chǔ)存:凍干粉末在2-8°C下穩(wěn)定一年。50mM Tris-HCl,pH 8.0和1mM CaCl2的溶液在2-8°C下穩(wěn)定數(shù)月。儲(chǔ)存于2-8°C。
艾美捷重組蛋白酶K,無(wú)動(dòng)物源/AF單位定義:在37°C,pH 7.5,使用尿素變性血紅蛋白作為底物,One Unit釋放1微摩爾Folin陽(yáng)性氨基酸(以酪-氨酸計(jì))。
相關(guān)研究:
Proteinase K
Source: Tritirachium album limber
A lyophilized powder. Purified to remove DNase and RNase.
Store at 2-8°C.
Proteinase K, Solution
Source: Tritirachium album limber
A concentrated, ready to use liquid formulation. Proteinase K prepared at 20mg/ml in 10mM Tris-HCl, 1mM calcium acetate, pH 7.5 containing 50% glycerol. DNase- and RNase- free.
Store at -20°C.
Proteinase K, (Recombinant) Solution
Source: Tritirachium album limber
A concentrated, ready to use liquid formulation. Recombinant Proteinase K prepared at 20mg/ml in 10mM Tris-HCl, 1mM calcium acetate, pH 7.5 containing 50% glycerol. DNase- and RNase- free. Store at -20°C
Store at -20°C.
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