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艾美捷SequENZ測序級改造型胰-蛋白酶特異性和應(yīng)用

時間:2022-11-15閱讀:39
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胰-蛋-白酶是一種胰絲-氨酸蛋白酶,具有基于帶正電荷的賴氨酸和精-氨酸側(cè)鏈的底物特異性(Brown and Wold 1973)。這種酶由胰腺排出,參與食物蛋白質(zhì)的消化和其他生物過程。胰-蛋白酶是一種中等大小的球狀蛋白,作為一種無活性的胰-蛋白酶原產(chǎn)生(Chen等人,2009)。

 

艾美捷SequENZ測序級改造型胰-蛋白酶用途:

在組織培養(yǎng)工作中,許多研究人員使用了沃辛頓胰-蛋白酶TRSEQZ、TRSEQIITRTPCK通常用于蛋白質(zhì)測序、定位和結(jié)構(gòu)研究。

沃辛頓改良測序級胰-蛋白酶,SequeENZ經(jīng)過廣泛純化以去除可能影響消化過程特異性的污染蛋白酶和胰-蛋白酶自溶副產(chǎn)物。隨后,對酶進行化學(xué)修飾以最小化自溶過程并增加穩(wěn)定性。進一步處理改性的胰-蛋白酶以去除殘留的自降解產(chǎn)物?;瘜W(xué)修飾后,常規(guī)檢查酶的特異性。

 

艾美捷SequENZ測序級改造型胰-蛋白酶特異性

胰-蛋白酶在賴氨酸和精-氨酸氨基酸殘基的C端側(cè)切割肽。如果脯-氨酸殘基位于切割位點的羧基側(cè),則不會發(fā)生切割。如果酸性殘基位于裂解位點的任一側(cè),則水解速率已顯示較慢。

 

艾美捷SequENZ測序級改造型胰-蛋白酶應(yīng)用

組織解離,尤其是與膠原酶和彈性蛋白酶等其他酶結(jié)合時

通過“胰-蛋白酶化"收獲細胞

線粒體分離

蛋白質(zhì)的體外研究

從塑料和玻璃中去除單層細胞

各種血凝程序

流式細胞儀DNA分析的樣品制備

Tryptic映射

指紋和測序工作

環(huán)境監(jiān)測

組織培養(yǎng)中細胞密度的降低

傳代細胞

裂解融合蛋白

從純化的糖蛋白中產(chǎn)生糖肽

 

相關(guān)文獻:

Abita, J. and Lazdunski, M.

On the Structural and Functional Role of Carboxylates in Chymotrypsinogen A: A Comparison with Chymotrypsin, Trypsinogen and Trypsin , Biochem Biophys Res Commun 35 , 707 , 1969

Abuchowski, A. and Davis, F.

Preparation and Properties of Polyethylene Glycol-Trypsin Adducts , Biochim Biophys Acta 578 , 41 , 1979


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