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Worthington丨艾美捷Worthington醛縮酶研究方案

時間:2022-10-20閱讀:68
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醛縮酶催化糖酵解和能量產(chǎn)生中的關(guān)鍵反應(yīng)。

 

醛縮酶存在于所有動植物組織以及大多數(shù)微生物中。在動物和高等植物組織中發(fā)現(xiàn)的 類醛縮酶的特點是不需要二價金屬輔因子,并且與底物磷酸二羥丙酮形成酮亞胺席夫堿中間體。僅在原核生物和低等真核生物中發(fā)現(xiàn)的 II 類醛縮酶需要二價金屬輔因子(Heron 和 Caprioli 1975,London 1974,和 Lebherz等人1973Gefflaut等人1995)。類醛縮酶分為三種類型: 型(主要形式)存在于肌肉中;肝腎B型;和大腦中的 型(加上一些 A)(Horecker等人1972)。

 

艾美捷Worthington醛縮酶穩(wěn)定性/儲存:酶在低于 4.5 的 pH 值下發(fā)生不可逆的變性。硫酸銨溶液中的結(jié)晶懸浮液,pH 7.6,在 2-8°下可穩(wěn)定至少六個月。

 

單位定義

在 25°C、pH 7.5 條件下,一個單位會導(dǎo)致每分鐘增加 1.0 A240,采用肼/3-磷酸甘油醛測定法(Jagannathan等人,Biochem. J., 63 94, 1956)。

 

艾美捷Worthington醛縮酶應(yīng)用

化學(xué)酶合成(Bolt et al . 2008 和 Calveras et al. 2009

結(jié)構(gòu)-功能研究 (St.-Jean et al. 2005)

有機合成(Castillo等人, 2006 年,Concia等人, 2009 年)

D-果糖-1,6-二磷酸的定量

耦合反應(yīng)中的代謝物測定 (Hiller et al. 2007)

柱和凝膠中的分子量標(biāo)記

 

艾美捷Worthington醛縮酶的特征:

分子量:

156.8 kDa(理論值)

x佳 pH

6.9-8.8

等電點:

8.47(理論)

消光系數(shù):

133,560 cm -1 M -1(理論值)

E 1%,280 = 8.52(理論)

活性位點殘留:

賴氨酸 (K229)

加上其他帶電殘基(由于在活性位點發(fā)現(xiàn)的許多帶電氨基酸非常接近,功能分配很復(fù)雜)(St.-Jean et al . 2005

 

艾美捷Worthington醛縮酶測定方法:

基于 Boyer 對肼測定法的改進 (Jagannathan等人1956),其中 3-磷酸甘油醛與肼反應(yīng)形成在 240 nm 處吸收的腙。該系統(tǒng)的優(yōu)點是其簡單性和特異性。一個單位被描述為在指丨定條件下 25°和 pH 7.5 時每分鐘 1.00 的吸光度變化。Rutter (1961) 已經(jīng)描述了測定醛縮酶的替代方法。已使用偶聯(lián)的α-甘油磷酸脫氫酶測定法(Richards et al . 1961)。

 

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艾美捷Worthington醛縮酶部分參考文獻(xiàn):

Allen, B. , Gracy, R. and Harris, B.

Studies on Aldolase from Human Cardiac Tissue , Arch Biochem Biophys 155 , 325 , 1973

Anderson, L. , Heinrikson, R. and Nyes, C.

Chloroplast and Cytoplasmic Enzymes. Subunit Structure of Pea Leaf Aldolases , Arch Biochem Biophys 169 , 262 , 1975

Anderson, P. and Kaplan, H.

Reactivity of the Active-Centre Lysine Residue of Rabbit Muscle Aldolase , Biochem J 137 , 181 , 1974

 

Worthington核心酶用于生命科學(xué)研究、原代細(xì)胞和干細(xì)胞分離、生物加工、生物制藥、診斷和生物技術(shù)應(yīng)用。艾美捷科技是Worthington的中國代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。


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