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多克隆意味著可靠和*的信號(hào)
多克隆檢測試劑通過放大信號(hào),即使是來自表達(dá)不佳的目標(biāo),仍然提供J佳靈敏度。Jackson 艾美捷多克隆抗體提供了異質(zhì)性抗體群體,每種抗體都有不同的副鏡檢測不同部分的一級(jí)抗體。下圖表明,通過結(jié)合整個(gè)一級(jí)抗體,而不是一個(gè)有限的特定位點(diǎn)/區(qū)域/序列,多克隆納米二級(jí)抗體可以大量修飾一級(jí)抗體、實(shí)現(xiàn)更高的標(biāo)記效率和更亮的信號(hào)。
圖:滋養(yǎng)層染色,用JIR納米秒增強(qiáng)亞細(xì)胞成像。細(xì)胞角蛋白8(藍(lán)色)(DyLight™ 405 VHH片段抗兔子(611-474-215)、vinculin(綠色)(Alexa Fluor®488 VHH片段防老鼠(615-544-214))和F-actin(紅色)。細(xì)胞角蛋白是一種中間絲,而管狀蛋白是一類局灶性粘連。用10%羊駝血清(028-000-001)阻斷兩幅圖像。圖片來源:Derek Sung,醫(yī)學(xué)博士/博士生·賓夕法尼亞大學(xué)醫(yī)學(xué)院
據(jù)報(bào)道,VHH片段的特別CDR(互補(bǔ)性確定區(qū)域)能夠獲得傳統(tǒng)抗體無法獲得的抗原表位(Bannas等人,2017年)。例如,VHH片段CDR3的長環(huán)結(jié)構(gòu)可能有助于與蛋白質(zhì)表面囊袋結(jié)合。
納米二級(jí)抗體出色的滲透性和間隙
由于納米體尺寸較?。?span style="font-family: Calibri;">Chakravarty et al 2014,Debie et al 2020,Hernández et al 2019),因此納米體表現(xiàn)出良好的組織滲透性,由于其擴(kuò)散系數(shù)低于常規(guī)抗體,納米體可以在組織中自由移動(dòng)(Jov?evska and Muyldermans,2019)。不存在片段結(jié)晶(Fc)進(jìn)一步提高了分子與組織的清除率,使其成為診斷成像技術(shù)(如Immuno-PET)的專業(yè)工具(Krasniqi等人,2018年)。
Jackson艾美捷納米二級(jí)抗體利用這些特別的特性,在無需長時(shí)間孵育或潛在破壞性清潔劑的情況下,可實(shí)現(xiàn)出色的組織滲透和清除。
染色細(xì)胞,死的還是活的
具有Fc片段的常規(guī)免疫球蛋白通常僅適用于固定樣本的標(biāo)記,因?yàn)榛罴?xì)胞的滲透性可通過Fc片段結(jié)合影響生物功能。缺乏Fc片段的納米體可用于活細(xì)胞的免疫染色(Lelek等人,2021)
交叉吸附以獲得更好的特異性和更低的背景
JIR納米二級(jí)VHH抗體與常用物種交叉吸附,以降低背景并增強(qiáng)特異性。Jackson艾美捷Nano Secondarys套件可以結(jié)合使用,生成非常具體的多標(biāo)簽圖像。
獲得全系列染料
使用共軛納米秒的間接標(biāo)記給研究人員提供了更多的實(shí)驗(yàn)范圍,允許他們使用熒光團(tuán)來利用在GFP等融合標(biāo)簽中克隆時(shí)可能無法獲得的波長。除了在蛋白質(zhì)上添加融合標(biāo)簽的潛在困難外,為了避免克隆,可以避免蛋白質(zhì)修飾產(chǎn)生的偽影,以提供更具代表性的功能數(shù)據(jù)(Lelek等人2021)。Jackson艾美捷JIR納米二價(jià)體可與紫外到遠(yuǎn)紅色的熒光結(jié)合,使研究人員在建立實(shí)驗(yàn)時(shí)具有最大的靈活性,特別是那些識(shí)別多個(gè)目標(biāo)蛋白的實(shí)驗(yàn)。
相關(guān)文獻(xiàn):
Bannas, P., Hambach, J. and Koch-Nolte, F., 2017. Nanobodies and Nanobody-Based Human Heavy Chain Antibodies As Antitumor Therapeutics. Frontiers in Immunology, 8.
Barakat, S., Berksoz, M., Zahedimaram, P., Piepoli, S. and Erman, B., 2022. Nanobodies as molecular imaging probes. Free Radical Biology and Medicine,.
Beltrán Hernández, I., Rompen, R., Rossin, R., Xenaki, K., Katrukha, E., Nicolay, K., van Bergen en Henegouwen, P., Grüll, H. and Oliveira, S., 2019. Imaging of Tumor Spheroids, Dual-Isotope SPECT, and Autoradiographic Analysis to Assess the Tumor Uptake and Distribution of Different Nanobodies. Molecular Imaging and Biology, 21(6), pp.1079-1088.
Jackson ImmunoResearch專注于親和純化的二抗和純化免疫球蛋白研究,服務(wù)于大學(xué)科研所和醫(yī)院里的動(dòng)物研究以及生物醫(yī)學(xué)研究機(jī)構(gòu)的科學(xué)家。艾美捷科技是Jackson的中國代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。
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