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艾美捷總膠原蛋白檢測(cè)試劑盒檢測(cè)原理和應(yīng)用

時(shí)間:2022-9-27閱讀:131
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QuickZyme 總膠原蛋白檢測(cè)試劑盒基于通過酸水解膠原蛋白獲得的羥脯丨氨酸殘基的定量比色測(cè)定。通常對(duì)于這種水解分析需要去除 HCl,這是一個(gè)耗時(shí)的步驟和/或需要特殊設(shè)備。

 

QuickZyme Total Collagen 測(cè)定是唯1一種不需要這個(gè)費(fèi)力步驟的基于羥脯丨氨酸的測(cè)定,從而在水解步驟后進(jìn)行快速(<2 小時(shí))和簡單(96 孔板格式)的測(cè)定。

 

膠原蛋白是細(xì)胞外基質(zhì)的主要成分之一。膠原蛋白生成的失調(diào)會(huì)導(dǎo)致諸如纖維化(膠原蛋白過多)或骨關(guān)節(jié)炎(膠原蛋白太少)等疾病。因此,膠原蛋白生成的測(cè)量在許多與疾病相關(guān)的研究中都很重要。

 

艾美捷 總膠原蛋白檢測(cè)試劑盒基于對(duì)羥脯丨氨酸的檢測(cè)。羥脯丨氨酸是一種非蛋白氨基酸,在哺乳動(dòng)物中存在于彈性蛋白和膠原蛋白中。它的存在主要限于膠原蛋白的三螺旋,其中它的存在增加了三螺旋的穩(wěn)定性。羥脯丨氨酸是通過脯丨氨酸羥化酶的作用從特定的脯丨氨酸殘基翻譯后形成的。組織水解物中的羥脯丨氨酸可用作膠原蛋白含量的直接量度。

 

51.jpg

 

通過在 95°下在 6M HCl 中*水解組織樣品來開始測(cè)量膠原蛋白。使用 Prockop 和 Udenfriend (Anal. Biochem., 1960, 1: 228-239) 描述的方法的改進(jìn)對(duì)水解產(chǎn)物中的羥脯丨氨酸殘基進(jìn)行定量。該測(cè)定法測(cè)量樣品中存在的羥脯丨氨酸的總量,它代表樣品中存在的所有類型的膠原蛋白,而不區(qū)分膠原蛋白的類型以及前膠原蛋白、成熟膠原蛋白和膠原蛋白降解產(chǎn)物。

 

該測(cè)定很簡單,產(chǎn)生的色原在 570 nm 處具有最大吸光度。該測(cè)定法的開發(fā)方式使其不需要酸水解后的干燥步驟,而酸水解通常需要特殊設(shè)備。

 

艾美捷 總膠原蛋白檢測(cè)試劑盒化學(xué)性質(zhì):

應(yīng)用組織、細(xì)胞提取物、組織勻漿

樣品要求50 - 500 微升

船運(yùn)在環(huán)境溫度下。收到后,將產(chǎn)品存放在以下推薦的溫度下。

存儲(chǔ)/到期未開封的試劑盒:在室溫 (RT) 下避光保存。請(qǐng)勿使用超過套件有效期的套件組件。

打開的試劑盒:重組試劑:打開的膠原蛋白標(biāo)準(zhǔn)品和檢測(cè)緩沖液應(yīng)避光儲(chǔ)存在 4°C。其他打開的試劑應(yīng)在室溫下避光儲(chǔ)存,并穩(wěn)定至少 個(gè)月。復(fù)溶的檢測(cè)試劑(A+B)應(yīng)在復(fù)溶當(dāng)天使用。

校準(zhǔn)范圍0 - 300 微克/毫升

檢測(cè)限2.5 微克/毫升

 

艾美捷 總膠原蛋白檢測(cè)試劑盒參考文獻(xiàn):

Ricard-Blum S. The collagen family. Cold Spring Harb Perspect Biol. 2011 Jan 1;3(1):a004978. doi: 10.1101/cshperspect.a004978. PMID: 21421911; PMCID: PMC3003457.


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