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藻膽蛋白由許多亞基組成,每個(gè)亞基具有蛋白質(zhì)骨架,線性四吡咯發(fā)色團(tuán)與之共價(jià)結(jié)合。藻紅蛋白(紅色)和藻藍(lán)蛋白(藍(lán)色)是兩種主要的藻膽蛋白。藻紅蛋白(PE)的吸收最大值介于 490 和 570 nm 之間,而藻藍(lán)蛋白(PC)的吸收最大值在 610 和 665 nm 之間。一般來(lái)說,藻膽蛋白在含有硫酸銨溶液中,冷藏儲(chǔ)存時(shí)具有良好的長(zhǎng)期穩(wěn)定性。純化的藻膽蛋白在酸性或堿性條件下可能分解成亞基,但在室溫下,在中性溶液中,濃度大于 0.1 mg/mL 時(shí)相對(duì)穩(wěn)定。解離的亞基通常比天然色素具有較低的著色和熒光。建議所有藻膽蛋白及其結(jié)合物(最好是在中性緩沖溶液中)冷藏保存,不能冷凍。
藻膽蛋白(包括 B-藻紅蛋白(B-PE),R-藻紅蛋白(R-PE)和別藻藍(lán)蛋白(APC))是用于生物檢測(cè)的超靈敏熒光染料。它們靈敏度比常規(guī)有機(jī)熒光團(tuán)高 100 倍以上,即使在流式細(xì)胞儀和免疫分析等實(shí)際應(yīng)用中也是如此。藻膽蛋白結(jié)合抗體的靈敏度通常遠(yuǎn)高于相應(yīng)的基于分子共軛物的有機(jī)抗體。
別藻藍(lán)蛋白(APC)是從螺旋藻(一種藍(lán)綠藻)中分離的藻膽蛋白。與其他藻膽蛋白一樣,APC 是具有J高的吸收率和高量子效率的熒光物質(zhì)。它是一種蛋白質(zhì),通過常規(guī)蛋白質(zhì)交聯(lián)技術(shù)可以很容易地與抗體和其他蛋白質(zhì)連接,而不會(huì)改變其光譜特征。別藻藍(lán)蛋白在主要的藻膽蛋白中是最不穩(wěn)定的,在低濃度下(包括某些實(shí)驗(yàn)濃度)易于解離。CL-APC 是指α和β亞基化學(xué)交聯(lián)而形成的比 APC 更穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)。交聯(lián)的別藻藍(lán)蛋白在水溶液中具有改善的穩(wěn)定性。
艾美捷AAT-2554別藻藍(lán)蛋白普通儲(chǔ)備溶液制備:
表 1.將特定質(zhì)量的APC [別藻藍(lán)蛋白]重構(gòu)至給定濃度所需的水量。請(qǐng)注意,體積僅用于制備儲(chǔ)備溶液。有關(guān)適當(dāng)?shù)膶?shí)驗(yàn)/生理緩沖液,請(qǐng)參閱示例實(shí)驗(yàn)協(xié)議。
0.1毫克 0.5毫克 1毫克 5毫克 10毫克
1毫米 952.381 毫升 4.762 µL 9.524 µL 47.619 µL 95.238 µL
5毫米 190.476 毫升 952.381 毫升 1.905 µL 9.524 µL 19.048 µL
10毫米 95.238 毫升 476.19 毫升 952.381 毫升 4.762 µL 9.524 µL
光譜特性:
消光系數(shù)(cm -1 M -1) 700000
激發(fā)(納米) 651
發(fā)射(納米) 660
艾美捷AAT-2554別藻藍(lán)蛋白圖片展示:
圖1.別藻藍(lán)蛋白 (APC) 是一種來(lái)自捕光藻膽蛋白家族的蛋白質(zhì),與藻藍(lán)蛋白、藻紅蛋白和藻紅藍(lán)蛋白一起。它是葉綠素的輔助色素。所有藻膽蛋白都是水溶性的,因此不能像類胡蘿卜素一樣存在于膜內(nèi),而是聚集形成粘附在膜上的簇,稱為藻膽體。別藻藍(lán)蛋白吸收和發(fā)射紅光,很容易在藍(lán)藻和紅藻中發(fā)現(xiàn)。藻膽素色素具有優(yōu)異的熒光特性,對(duì)于基于流式細(xì)胞術(shù)的免疫測(cè)定非常有用。
艾美捷AAT別藻藍(lán)蛋白基本參數(shù):
編號(hào):2554
規(guī)格:1毫克/10毫克
分子量:105000
溶劑:水
H-短語(yǔ):H303、H313、H333
危險(xiǎn)符號(hào):XN
有可能的使用:僅供研究使用 (RUO)
R-短語(yǔ):R20、R21、R22
貯存:冷藏(2-8°C);盡量減少曝光
UNSPSC:12171501
艾美捷AAT別藻藍(lán)蛋白參考文獻(xiàn):
Phycobiliprotein-Fab conjugates as probes for single particle fluorescence imaging
Authors: Triantafilou K, Triantafilou M, Wilson KM.
Journal: Cytometry (2000): 226
Novel activity of a phycobiliprotein lyase: both the attachment of phycocyanobilin and the isomerization to phycoviolobilin are catalyzed by the proteins PecE and PecF encoded by the phycoerythrocyanin operon
Authors: Zhao KH, Deng MG, Zheng M, Zhou M, Parbel A, Storf M, Meyer M, Strohmann B, Scheer H.
Journal: FEBS Lett (2000): 9
Phycobiliprotein and fluorescence immunological assay
Authors: Wu P., undefined
Journal: Sheng Li Ke Xue Jin Zhan (2000): 82
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