艾美捷Worthington Papain Dissociation System 是一套試劑，旨在用于 Huettner 和 Baughman 的神經(jīng)細(xì)胞分離方法 ( J. Neurosci., 6 , 3044, 1986)。這些材料是為了方便和簡(jiǎn)單而設(shè)計(jì)的，對(duì)偶爾使用的用戶以及更有經(jīng)驗(yàn)和經(jīng)常使用的用戶都很有用。每個(gè)批次都經(jīng)過(guò)大鼠脊髓神經(jīng)細(xì)胞分離性能測(cè)試，該試劑盒為每次解離提供新鮮制備的酶溶液。

穩(wěn)定性/儲(chǔ)存： 試劑在環(huán)境溫度下在正常運(yùn)輸程序中預(yù)期的一段時(shí)間內(nèi)是穩(wěn)定的，但包裝在到達(dá)時(shí)應(yīng)冷藏。使用前，內(nèi)容物可在 2-8°C 下保存 4-6 個(gè)月。儲(chǔ)存在 2-8°C。

艾美捷Worthington木瓜蛋白酶解離系統(tǒng)包裝內(nèi)容：

該包裝包含足夠的材料，可以分離五份最多 0.3-0.4 cm 3的單獨(dú)組織等分試樣。對(duì)于較大的組織樣本，在每個(gè)步驟中按比例準(zhǔn)備較大體積的試劑，并按照協(xié)議中所述的相同比例將它們組合起來(lái)。

• 小瓶1： 含有鈣、鎂、碳酸氫鹽和酚紅的無(wú)菌厄爾EBSS，每包一瓶，100 毫升。該小瓶的等分試樣用于重構(gòu)其他小瓶并制備稀釋的抑制劑溶液。在使用之間冷藏并在每次使用前用無(wú)菌 O 2 :CO 2平衡。

• 小瓶2：含有L-半guang氨酸和EDTA 的木瓜蛋白酶，每包5 x 100 單位一次性小瓶。該材料經(jīng) 0.22 微米膜過(guò)濾并在高壓滅菌的小瓶中凍干。用 5ml EBSS（小瓶 1）重構(gòu)的小瓶在 1mM L-半guang氨酸和 0.5mM EDTA 中產(chǎn)生每毫升 20 單位木瓜蛋白酶的溶液。需要在 37°C 下短暫孵育以確保*溶解和活性。

• 小瓶3：脫氧核糖核酸酶I (DNase)，每包5 x 2000 單位一次性小瓶。

該材料經(jīng)過(guò) 0.22 微米膜過(guò)濾并在高壓滅菌小瓶中凍干。用 0.5ml EBSS（小瓶 1）復(fù)溶的小瓶產(chǎn)生每毫升 2000 單位脫氧核糖核酸酶的溶液。避免劇烈混合。

• 小瓶4：含有牛血清白蛋白的卵類粘蛋白蛋白酶抑制劑，每包一瓶，重構(gòu)后32ml。

該材料經(jīng)過(guò) 0.22 微米膜過(guò)濾并在高壓滅菌小瓶中凍干。用 32ml EBSS（小瓶 1）復(fù)溶的小瓶產(chǎn)生的溶液的有效濃度為每毫升 10mg 的卵類粘蛋白抑制劑和 10mg 白蛋白。該小瓶的等分試樣用于每次解離。在使用之間冷藏并在每次使用前用無(wú)菌 O 2 :CO 2平衡。在 2-8°C 儲(chǔ)存時(shí)，重構(gòu)后穩(wěn)定。

還包括一張將顏色與 pH 值關(guān)聯(lián)起來(lái)的卡片，用作 O 2 :CO 2平衡的指南。

艾美捷Worthington木瓜蛋白酶解離系統(tǒng)相關(guān)研究：

膠原酶 (CLS1-4/CLSPA)

脫氧核糖核酸酶 I (DP/D/DCLS/D2/DPFF/DPRF)

透明質(zhì)酸酶 (HSE/HSEP)

蛋白酶 K (PROK)

細(xì)胞分離優(yōu)化系統(tǒng) (CIT)

肝細(xì)胞分離系統(tǒng) (HIS)

新生兒心肌細(xì)胞分離系統(tǒng) (NCIS)

相關(guān)參考文獻(xiàn)：

1.Bader, C.、MacLeish, P. 和 Schwartz, E.： 對(duì)從 Tiger Salamander Retina 分離的孤立棒狀感光器的光的反應(yīng) ， Proc Natl Acad Sci USA 75 , 3507, 1978

2.巴紹爾，馬克 M： 卷。五十八 (I) ,, , 124, 1979

3.Dreyfus, Cheryl F. 和 Black, Ira B.: Methods Neurosci 2 , 10, 1990

4.Finkbeiner, S. 和 Stevens, CF： 定量測(cè)量在評(píng)估gu氨酸神經(jīng)毒性中的應(yīng)用 ， Proc Natl Acad Sci USA 85 , 4071, 1988

Worthington主要研究覆蓋生物技術(shù)和生命科學(xué)研究，診斷，生物制藥和生物加工應(yīng)用的高質(zhì)量純化酶，蛋白質(zhì)，核酸和試劑盒。艾美捷科技是Worthington的中國(guó)代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。