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木瓜蛋白酶是一種半胱丨氨酸水解酶,在廣泛的條件下穩(wěn)定且具有活性。即使在高溫下它也非常穩(wěn)定(Cohen et al. 1986)。Carica papaya的乳膠富含四種半胱丨氨酸內(nèi)肽酶,包括木瓜蛋白酶、木瓜凝乳蛋白酶、甘氨酰內(nèi)肽酶和 caricain。這些蛋白質(zhì)被合成為無(wú)活性的前體,在植物受傷并排出乳膠后兩分鐘內(nèi)變得活躍。木瓜蛋白酶是一種次要成分,但因其更容易純化而得到更廣泛的研究(Azarkan 2003)。
木瓜蛋白酶是具有三個(gè)二硫鍵和酶活性所必需的巰基的單鏈多肽。木瓜蛋白酶被表達(dá)為一種無(wú)活性的前體,prepropapain。活性木瓜蛋白酶的形成需要幾個(gè)切割步驟,包括首先切割 18 個(gè)氨基酸前區(qū)(信號(hào)序列),然后進(jìn)一步切割糖基化的 114 個(gè)氨基酸前區(qū)。該前區(qū)用作內(nèi)在抑制劑和折疊模板。
Worthington 艾美捷木瓜蛋白酶特異性:
它具有內(nèi)肽酶、酰胺酶和酯酶活性。活性位點(diǎn)由七個(gè)亞位點(diǎn)(S 1 -S 4和 S 1' -S 3')組成,每個(gè)亞位點(diǎn)可以容納底物的一個(gè)氨基酸殘基(P 1 -P 4和 P 1' -P 3')(Schechter和伯杰 1967)。特異性由 S 2亞位點(diǎn)控制,S 2 亞位點(diǎn)是一個(gè)容納底物 P 2側(cè)鏈的疏水袋。木瓜蛋白酶表現(xiàn)出特定的底物偏好,主要是對(duì)該子位點(diǎn)的大量疏水或芳香殘基(Kimmel 和 Smith 1954)。在 S 2之外子位點(diǎn)偏好,活性位點(diǎn)內(nèi)缺乏明確定義的殘基選擇性。
Worthington 艾美捷木瓜蛋白酶分子特征:
所有木瓜蛋白酶的成熟形式都在 212 到 218 個(gè)氨基酸之間,并表現(xiàn)出很強(qiáng)的同源性 (Azarkan 2003)。X 射線結(jié)構(gòu)分析表明它們采用相同的三維折疊(Pickersgill 等人 1991、O'Hara 等人 1995 和 Maes 等人1996)。
木瓜蛋白酶被合成為具有 133 個(gè)氨基酸的 N 末端區(qū)域的酶原,該區(qū)域不是活性酶的一部分(Cohen 等人 1986)。木瓜蛋白酶前體基因 prepropapain 已被克隆并部分或整體表達(dá)(Cohen 等人 1986 和 Choudhury 等人2009)。
Worthington 艾美捷木瓜蛋白酶應(yīng)用:
比其他蛋白酶更溫和的細(xì)胞分離(即:皮質(zhì)神經(jīng)元、視網(wǎng)膜和平滑?。?/span>
蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)研究、肽圖分析
用于抗體篩選或鑒定的紅細(xì)胞表面修飾
從 IgG 和 IgM 抗體制備 Fab
整合膜蛋白的溶解
從純化的蛋白聚糖生產(chǎn)糖肽
酶促傷口清創(chuàng)
Worthington專注于生物技術(shù)和生命科學(xué)研究,診斷,生物制藥和生物加工應(yīng)用的高質(zhì)量純化酶,蛋白質(zhì),核酸和試劑盒。其核心酶包括:膠原蛋白酶,脫氧核糖核酸酶I,彈性蛋白酶,木瓜蛋白酶,核糖核酸酶,胰丨蛋白酶等。艾美捷科技是Worthington的中國(guó)代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。
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