辣根過氧化物酶 (HRP) 綴合物通過改進的 Nakane 和 Kawaoi 程序 (J. Histochem. Cytochem. 1974. 22 , 1084) 制備。過氧化物酶偶聯(lián)物通常用于免疫組織化學(xué)、蛋白質(zhì)印跡和 ELISA。親和純化的抗辣根過氧化物酶和偶聯(lián)物可用于檢測辣根過氧化物酶抗原或用于放大含有 HRP 的試劑的信號。對于哺乳動物細(xì)胞的免疫染色，使用抗辣根過氧化物酶的優(yōu)勢在于降低背景，因為抗體不識別在這些細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的內(nèi)源性過氧化物酶樣酶。

艾美捷辣根過氧化物酶HRP標(biāo)記親和純化驢抗兔IgG（H+L）二抗已通過 ELISA 和/或固相吸附測試，以確保與牛、雞、山羊、豚鼠、敘利亞倉鼠、馬、人、小鼠、大鼠和綿羊血清蛋白的交叉反應(yīng)J小，但它可能會交叉與其他物種的免疫球蛋白發(fā)生反應(yīng)。

艾美捷辣根過氧化物酶HRP標(biāo)記親和純化驢抗兔IgG（H+L）二抗參數(shù)：

目標(biāo)： 兔

宿主：驢

抗體形式： Whole IgG

特異性： IgG (H+L)

J小交叉反應(yīng)性：牛、雞、山羊、豚鼠、敘利亞倉鼠、馬、人、小鼠、大鼠、綿羊血清蛋白

偶聯(lián)物：辣根過氧化物酶

類別： 全 IgG 親和純化抗體

克隆性：多克隆

RRID： AB_10015282

物理狀態(tài)：凍干固體

儲存和再水化：將凍干的固體儲存在 2-8°C。用一定體積的 dH2O 再水化，如果不清楚則離心。在使用當(dāng)天準(zhǔn)備工作稀釋液。在 2-8°C 下可穩(wěn)定保存約 6 周，為未稀釋液體。

純度： 使用與瓊脂糖珠偶聯(lián)的抗原，通過免疫親和層析從抗血清中純化抗體。

緩沖液： 0.01M 磷酸鈉，0.25M NaCl，pH 7.6

穩(wěn)定劑： 15 mg/ml 牛血清白蛋白（不含 IgG，不含蛋白酶）

建議的工作濃度或稀釋范圍：

1:500 - 1:5,000 用于免疫組織/細(xì)胞化學(xué)

1:5,000 - 1:100,000 用于 ELISA 和使用顯色底物的蛋白質(zhì)印跡

1:10,000 - 1:200,000 用于使用 ECL 底物的蛋白質(zhì)印跡

稀釋因子以范圍的形式呈現(xiàn)，因為J佳稀釋度是許多因素的函數(shù)，例如抗原密度、滲透性等。實際使用的稀釋度須憑經(jīng)驗確定。

Alexa Fluor® 488 偶聯(lián)抗體在 493 nm 處最大吸收光，并在 519 nm 附近發(fā)出峰值熒光。在水性封固劑中，它們比 FITC、Cy2 和 DyLight 488 更亮。建議使用 Alexa Fluor® 488 偶聯(lián)物，以在所有需要綠色熒光染料的免疫熒光程序中實現(xiàn)最高靈敏度，但包括在塑料封固劑中封固的方案除外。