MyBioSource 艾美捷 腸激酶抑制劑篩選試劑盒--利用含有腸激酶特異性識別序列且?guī)в?span style="font-family: Calibri;">AFP熒光標(biāo)記的多肽底物，在腸激酶的催化作用下，該多肽底物被裂解，并釋放AFC分子，繼而通過測量其在Ex/Em = 380/500 nm的熒光強(qiáng)度，在強(qiáng)效腸肽酶抑制劑存在下，底物的水解會受到阻礙，熒光強(qiáng)度會減弱，通過熒光強(qiáng)度的變化，達(dá)到篩選腸激酶抑制劑的目的。

MyBioSource 艾美捷該試劑盒組成：

腸肽酶分析緩沖液20毫升

腸肽酶底物0.2ml

人腸肽酶0.17毫升

腸肽酶特異性抑制劑（0.6 mM）0.1 ml

MyBioSource 艾美捷試劑準(zhǔn)備：

1.人腸肽酶：用910µl腸肽酶分析緩沖液重組，獲得1mU/µl的溶液。等分保存在-80°C。避免重復(fù)冷凍/解凍。在-80°C下穩(wěn)定2個月。

40 μl Enteropeptidase Assay Buffer

10 μl Enteropeptidase enzyme (1mU/µl)

2.篩選化合物、抑制劑對照品和空白對照品：將候選抑制劑溶解到適當(dāng)?shù)娜軇┲?。用腸肽酶分析緩沖液稀釋至所需試驗濃度的4倍。將25μl稀釋試驗抑制劑或分析緩沖液添加到腸肽酶孔中，作為樣品篩選[S]或酶對照[EC]（無抑制劑）。對于抑制劑控制，將10μl腸肽酶特異性抑制劑和15μl腸肽酶分析緩沖液添加到腸肽酶孔中。在室溫下培養(yǎng)10-15分鐘。

3.腸肽酶底物制備：每個孔制備25μl底物溶液。

23 µl of Enteropeptidase Assay Buffer

2 μl of Enteropeptidase Substrate

混合并向每個孔中添加25µl腸肽酶底物溶液。攪拌均勻。

4.測量：以動力學(xué)模式測量熒光30-60分鐘（Ex/Em=380/500 nm）。在繪圖的線性范圍內(nèi)選擇兩個時間點（T1和T2），并獲得相應(yīng)的熒光值（RFU1和RFU2）。

MyBioSource 艾美捷該試劑盒存儲：

在-20°C溫度下存放工具包，避免光線照射。使用前將分析緩沖液加熱至室溫。在打開之前，以低速（高速不適合酶）短暫離心小瓶子。

艾美捷科技是MyBioSource的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。