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當(dāng)前位置:武漢艾美捷科技有限公司>>公司動(dòng)態(tài)>>【新手使用】人脂磷壁酸(LTA)ELISA試劑盒測(cè)定原理
磷壁酸(teichoic acid)是革蘭氏陽(yáng)性(G+)菌細(xì)胞壁特殊組份,由核糖醇(Ribitol)或甘油(Glyocerol)殘基經(jīng)由磷酸二鍵互相連接而成的多聚物。是一種弱酸性物質(zhì)。其含量會(huì)隨著培養(yǎng)基成分變化而變化,一般占細(xì)胞壁質(zhì)量的10%,有時(shí)可接近50%。
根據(jù)其在細(xì)胞表面上的固定方式,磷壁酸可分為壁磷壁酸(Wall teichoic acid)和膜磷壁酸(Membrane teichoic acid)兩種,前者不深入質(zhì)膜,其末端以磷酸二酯鍵與肽聚糖的N-乙酰胞壁酸殘基連結(jié)。膜磷壁酸又稱脂磷壁酸(Lipteichoic acid)跨過(guò)肽聚糖層,以其末端磷酸共價(jià)連接于質(zhì)膜中糖脂(例如二葡糖基二?;视停┑墓烟腔糠?。
磷壁酸抗原性很強(qiáng),是革蘭氏陽(yáng)性菌的重要表面抗原;在調(diào)節(jié)離子通過(guò)粘液層中起作用;也可能與某些酶的活性有關(guān);某些細(xì)菌的磷壁酸,能粘附在人類細(xì)胞表面,其作用類似菌毛,可能與致病性有關(guān)。
脂磷壁酸(Lipoteichoic Acid,LTA)是革蘭氏陽(yáng)性菌細(xì)胞壁的主要成分。這些有機(jī)體有一個(gè)內(nèi)(或細(xì)胞質(zhì))膜,在其外部有一個(gè)厚(高達(dá)80 nm)的肽聚糖層。脂磷壁酸的結(jié)構(gòu)因革蘭氏陽(yáng)性菌的不同種類而異,可能含有長(zhǎng)鏈核糖醇或磷酸甘油。脂磷壁酸通過(guò)二?;视凸潭ㄔ诩?xì)胞膜上。它充當(dāng)自溶壁酶(胞壁酸酶)的調(diào)節(jié)劑。且具有抗原特性,能夠刺激特定的免疫反應(yīng),主要在溶丨菌酶、白細(xì)胞陽(yáng)離子肽或β-內(nèi)酰胺抗生素誘導(dǎo)溶菌后從細(xì)菌細(xì)胞中釋放出來(lái)。
Abbexa/艾美捷 人脂磷壁酸(LTA)ELISA試劑盒,用于體外定量測(cè)量人血清、血漿等樣本中的脂磷壁酸(LTA)濃度。僅用于科研,不可用于臨床診斷。
人脂磷壁酸(LTA)ELISA試劑盒測(cè)定原理:
該試劑盒基于夾心法酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定技術(shù)??贵w預(yù)包被在96孔板上。將標(biāo)準(zhǔn)品、測(cè)試樣品和生丨物素偶聯(lián)試劑加入孔中并孵育。然后加入HRP偶聯(lián)試劑,并孵育整個(gè)平板。在每個(gè)階段使用洗滌緩沖液去除未結(jié)合的偶聯(lián)物。TMB底物用于定量HRP酶促反應(yīng)。添加TMB底物后,只有含有足夠LTA的孔才會(huì)產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物,然后在加入酸性終止液后變?yōu)辄S色。 黃色的強(qiáng)度與結(jié)合在板上的LTA量成正比。在酶標(biāo)儀中于450nm處用分光光度法測(cè)量光密度(OD),由此可以計(jì)算LTA的濃度。
人脂磷壁酸(LTA)標(biāo)曲:
以上,就是關(guān)于人脂磷壁酸(LTA)ELISA試劑盒的相關(guān)研究。
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