在許多生物學(xué)應(yīng)用中，我們都需要對(duì)微量的雙鏈DNA（dsDNA）進(jìn)行定量 例如：cDNA文庫(kù)構(gòu)建、亞克隆的DNA丨片段的純化、定量DNA擴(kuò)增產(chǎn)物在藥物分子種的殘留等。常規(guī)檢測(cè)核酸濃度的方法是吸光度法，即檢測(cè)核酸在260nm ( A260 )處的光吸收，吸光度法的弊端是樣本中的單鏈核苷酸和單體核苷酸會(huì)產(chǎn)生干擾信號(hào)，樣品中的雜質(zhì)也會(huì)影響結(jié)果。吸光法無法區(qū)分DNA和RNA, 靈敏度也相對(duì)較低(用1cm的比色杯在A260值為0.1時(shí)相對(duì)應(yīng)的雙鏈DNA濃度為5ug/ml )。

接下來給大家?guī)戆澜?nbsp;Lumiprobe 熒光法雙鏈DNA檢測(cè)工具—Pico488 dsDNA 定量試劑盒，Pico488是一種J為靈敏的熒光核酸染料，常用于雙鏈DNA的定量檢測(cè)。歷來DNA濃度的測(cè)定在cDNA文庫(kù)的構(gòu)建，DNA亞克隆、PCR產(chǎn)物的估測(cè)等領(lǐng)域中具有重要意義，疫苗等生物制品中殘留微量DNA的檢測(cè)更是直接關(guān)系到人類的健康。

Pico488僅在與DNA雙鏈結(jié)合后才發(fā)出熒光，且所產(chǎn)生的熒光與DNA濃度呈正比，在存在ssDNA、RNA和單體核苷酸的條件下，可以選擇性地檢測(cè)低至pg級(jí)別的dsDNA。該分析在三個(gè)數(shù)量級(jí)范圍內(nèi)呈線性，且?guī)缀鯚o序列依賴性，可以較精確地測(cè)量多個(gè)來源的DNA，包括基因組DNA、病毒DNA、小量提取DNA或PCR擴(kuò)增產(chǎn)物，可用熒光分光光度計(jì)或熒光酶標(biāo)儀讀數(shù)，Ex/Em=503nm/525nm。

艾美捷 Lumiprobe丨Pico488 dsDNA 定量試劑盒特色如下：

相比傳統(tǒng)的方法，如紫外吸光法（A260）、探針雜交法、Hoechst 33258染料法等，Pico488 dsDNA 定量具有以下優(yōu)勢(shì)：

①靈敏度高：數(shù)量級(jí)較UV吸光讀數(shù)更敏感，檢測(cè)范圍為：1pg/ul–5ng/ul，可節(jié)省寶貴的樣品；

②特異性強(qiáng)：在等摩爾的RNA存在的條件下，對(duì)dsDNA具有特異性；

③耐受性好：耐受較高濃度的鹽、尿素、乙醇、氯仿、去垢劑、蛋白或瓊脂糖，可以直接定量PCR擴(kuò)增產(chǎn)物而無需從反應(yīng)混合物中純化DNA；

④易于使用：只需在樣品中加入染料，等待5分鐘，然后讀數(shù)即可，且適用于24和96孔板；與市面上的大多數(shù)熒光酶標(biāo)儀和熒光計(jì)兼容；

⑤適用范圍廣：可適用于PCR的分析、芯片樣品、DNA損傷分析、酶活性分析、基因組DNA定量以及復(fù)雜混合物中dsDNA的檢測(cè)和病毒DNA定量等多種領(lǐng)域。

艾美捷 Lumiprobe丨Pico488 dsDNA 定量試劑盒應(yīng)用領(lǐng)域：

測(cè)定微量的DNA殘留（如疫苗生產(chǎn)）；對(duì)DNA樣品進(jìn)行較精確定量

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艾美捷科技是Lumiprobe的中國(guó)代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。