為了找到合適的條件，PolyMag CRISPR須以1µL/µg DNA的比例進行測試。為了DNA數(shù)量，建議96-well,每well 0.0625/0125/0.25µg，24-well每孔0.25/0.5/1µg以及在6孔中每孔1/2/4µg。

這些條件可能需要根據(jù)你的細胞、DNA、RNA等進行進一步的優(yōu)化。

艾美捷OZ Biosciences PolyMag CRISPR試劑盒優(yōu)化協(xié)議：

建議您優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件，以充分利用磁轉(zhuǎn)染?. 可以優(yōu)化幾個參數(shù)：

•使用的核酸劑量

•PolyMag CRISPR與核酸的比例

•細胞密度

•培養(yǎng)時間

1.首先優(yōu)化PolyMag CRISPR/DNA的比例。為此，使用固定數(shù)量的DNA。變化PolyMag CRISPR的量為0.25至5m升/mg的DNA。PolyMag CRISPR/DNA的比例可以通過將所使用的試劑的體積加倍或相乘來改變。試劑可以是在去離子水中預先稀釋。

2.此后，以固定比例的PolyMag CRISPR/DNA改變核酸劑量之前進行了優(yōu)化。為此，您可以對預成型的磁矢量復合體。

3.也可以研究每個質(zhì)粒的化學計量：改變每個質(zhì)粒的比例整個混合物中的DNA。

4.在確定了正確數(shù)量的PolyMag CRISPR和核酸后，您可以通過優(yōu)化復合體的細胞數(shù)量和孵育時間來實現(xiàn)這一過程形成和用于磁場應用。