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當(dāng)前位置:武漢艾美捷科技有限公司>>技術(shù)文章>>中英文說明書丨艾美捷PolyMag CRISPR試劑盒
PolyMag CRISPR kit is the only magnet assisted transfection reagent optimized to deliver high level of plasmid DNA and/or mRNA expressing Cas9 and guide RNA (gRNA). This reagent is based on our proprietary Magnetofection™ technology. The nanoparticles are composed of iron oxide magnetic core coated with cationic molecules. For your gene editing experiments, this reagent provides high transfection efficiency without toxicity.
Benefits:
• High efficiency delivery of CRISPR/Cas9 system even on primary and hard to transfect cells
• Ideal for co-transfection of pDNA/pDNA, pDNA/gRNA, pDNA/mRNA
• Optimized for large plasmid DNA containing Cas9, and guide RNA
• Low cell toxicity - enable to start your experiment with less cell
Additional products for CRISPR Cas9 experiments:
ViroMag CRISPR to enhance transduction efficiency of CRISPR/Cas9 viruses
RmesFect CRISPR for mRNA transfection
ProDeliverIN CRISPR for Cas9 protein delivery
艾美捷PolyMag CRISPR試劑盒是特別經(jīng)過優(yōu)化的磁鐵輔助轉(zhuǎn)染試劑,可提供表達 Cas9 和向?qū)?RNA (gRNA) 的高水平質(zhì)粒 DNA 和/或 mRNA。該試劑基于我們專有的磁感應(yīng)™技術(shù)。納米顆粒由涂有陽離子分子的氧化鐵磁芯組成。對于您的基因編輯實驗,該試劑具有高轉(zhuǎn)染效率,無毒性。
PolyMag CRISPR試劑盒優(yōu)點:
• 即使在原代細(xì)胞和難以轉(zhuǎn)染的細(xì)胞上也能高效遞送 CRISPR/Cas9 系統(tǒng)• 非常適合共轉(zhuǎn)染 pDNA/pDNA、pDNA/gRNA、pDNA/mRNA
• 針對含有 Cas9 的大質(zhì)粒 DNA 進行了優(yōu)化,并引導(dǎo) RNA
• 低細(xì)胞毒性 - 能夠以更少的細(xì)胞開始實驗
用于CRISPR Cas9實驗的其他產(chǎn)品:
ViroMag CRISPR提高CRISPR/Cas9病毒的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率
RmesFect CRISPR 用于 mRNA 轉(zhuǎn)染
ProDeliverIN CRISPR用于 Cas9 蛋白遞送
儲存: +4°C
運輸條件:室溫
方案|DNA或shRNA載體轉(zhuǎn)染粘附細(xì)胞:
1.細(xì)胞制備
建議在轉(zhuǎn)染前一天對細(xì)胞進行種子接種或平板接種。合適的細(xì)胞密度將取決于生長速率和細(xì)胞條件。細(xì)胞應(yīng)在磁化時間。對于懸浮細(xì)胞,使用給定的特定方案在下面在轉(zhuǎn)染之前,可以用新鮮培養(yǎng)基代替培養(yǎng)基(可選不含血清)。
2.DNA/PolyMag CRISPR復(fù)合物的制備
a.PolyMag CRISPR:使試劑渦旋,并將適量的試劑放入空的微管。
b.DNA:將指-定數(shù)量的DNA(見表1)稀釋50至200m培養(yǎng)基的L不含血清和補充劑。
c.通過劇烈移液和孵育將DNA溶液添加到PolyMag CRISPR溶液中在室溫下放置20分鐘。不要產(chǎn)生渦流。
3.轉(zhuǎn)染
a.將PolyMag CRISPR/DNA復(fù)合物逐滴添加到細(xì)胞上,并輕輕搖動板,以確保均勻分布。將細(xì)胞培養(yǎng)板放置在磁性板上在30分鐘內(nèi)。
b.拆下磁性板。
c.在標(biāo)準(zhǔn)條件下,在37°c的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)細(xì)胞,直到評估轉(zhuǎn)基因表達(從24小時到7天)
注:
在細(xì)胞對轉(zhuǎn)染非常敏感的情況下,可以在轉(zhuǎn)染后立即更換培養(yǎng)基磁感染程序
? 將細(xì)胞保持在磁性板上,并用新鮮預(yù)熱的完-全培養(yǎng)基。
一些細(xì)胞類型需要在轉(zhuǎn)染后2-4小時更換培養(yǎng)基
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