GFAP抗體（FC50001）背景：

GFAP抗體已經(jīng)被廣泛證實僅識別星形膠質(zhì)細(xì)胞(astrocyte，也稱astroglia)，而不識別神經(jīng)細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、少突膠質(zhì)細(xì)胞(oligodendrocyte)以及腫瘤細(xì)胞等其它類型的細(xì)胞。因此GFAP抗體被廣泛用于星形膠質(zhì)細(xì)胞的免疫染色鑒定，也常用作星形膠質(zhì)細(xì)胞Western檢測時的參考檢測以確認(rèn)不同泳道的上樣量是否相近。需要注意的是，GFAP在Schwann細(xì)胞和enteric glia中也可以被觀察到。

艾美捷 GFAP抗體（FC50001）基本參數(shù)：

中文名稱：GFAP抗體

英文名字：GFAP Antibody -W

cat#：FC50001

規(guī)格：200ul

應(yīng)用類型：IHC

免疫原：這種抗體是多克隆抗體，在兔體內(nèi)產(chǎn)生的肽序列是NAGFKETRASERAE（人、大鼠和小鼠），在注射到兔體內(nèi)之前，用戊二醛將其與甲狀腺球蛋白偶聯(lián)。

來源宿主：兔

反應(yīng)性：人，大鼠

保存建議：小瓶中含有約200微升1/100稀釋液。 抗體可在BSA稀釋液（50 mM KPBS、0.4%Triton、1%BSA、1%NGS）中進(jìn)一步稀釋至至少1/20，000。 抗體應(yīng)在-20 ℃下儲存。 還包括吸附有用于封閉的特異性肽的濾紙。 可向管中加入500 μ l稀釋的抗體以獲得10 μ M阻斷。 應(yīng)用于組織前，在室溫（RT）下孵育至少1小時。 抗體特異性地與該肽阻斷，而不與吸附在濾紙上的其他肽阻斷。

GFAP抗體（FC50001）基本操作：

將新鮮冷凍的10-30微米切片在室溫下固定在4%多聚甲醛（FA）中1小時磷酸鹽緩沖鹽水（PBS），并在PBS中與0.1-0.3%H2O2孵育10至30分鐘。這個再次在PBS中洗滌組織，然后用Avidin/Biotin阻斷試劑盒（Vector cat#SP-2001）處理，洗滌并在室溫下用BSA稀釋劑孵育1小時。將GFAP抗體（1/30000）應(yīng)用于組織在室溫下過夜。

在PBS中洗滌后，將切片在1/1000的生-物素化GAR中孵育（Vector labs cat#BA1000）在室溫下1小時，洗滌，然后在阿維丁/生-物素中以1/1000（Vector labs cat#PK6100）在室溫下1小時。洗滌后，用二氨基聯(lián)苯胺（0.04%）在0.1M乙酸鈉與0.06%H2O2混合六分鐘（也可加入2.5%的氯化鎳）。然后對切片進(jìn)行水洗（如果需要，進(jìn)行復(fù)染）、脫水并蓋上蓋子。

注意事項：

1. 在Western實驗后，請注意回收稀釋的抗體?；厥盏目贵w在進(jìn)行Western實驗時至少可以重復(fù)使用10次。稀釋后的抗體，包括已經(jīng)使用過的稀釋抗體，4℃保存。

2. 回收后重復(fù)使用的抗體，使用方法同新鮮稀釋的抗體。如果在重復(fù)使用過程中發(fā)現(xiàn)抗體出現(xiàn)輕微混濁現(xiàn)象，可以10000g離心1-3分鐘，取上清用于后續(xù)檢測。如果回收的抗體出現(xiàn)明顯的絮狀物或長霉長菌等情況，則可以考慮廢棄該抗體。