艾美捷Fluorochorome熒光金(Fluoro-Gold)抗體的儲(chǔ)存和制備：

您將在一個(gè)小藥瓶中收到熒光金抗體。這是一種在兔體內(nèi)培養(yǎng)的多克隆抗體。小瓶將含有約100µl的抗體溶液。您不會(huì)收到冷凍的抗體，但應(yīng)立即冷凍并儲(chǔ)存在寒冷（-20oC）、黑暗、干燥的環(huán)境中。一旦溶液解凍以準(zhǔn)備工作滴定度，不要再冷凍溶液。一臺(tái)好的商用冰箱的冷凍部分，沒(méi)有防凍功能，應(yīng)該足夠了。如果適當(dāng)且連續(xù)冷凍，抗體溶液可儲(chǔ)存長(zhǎng)達(dá)一年。

抗體溶液應(yīng)保持冷凍，直到可以使用。100µl抗體等分試樣的稀釋度為1/100?？贵w可在BSA稀釋劑（50mM KPBS、0.4%Triton、1%BSA、1%NGS）中進(jìn)一步稀釋1/50000至1/100000倍，以產(chǎn)生50ml至100ml的工作效價(jià)。這意味著你可以將收到的溶液稀釋500至1000倍。

如果您使用Vector精英套件，這將治療300至1000個(gè)切片。制備后，抗體溶液可在涼爽（4oC）、黑暗和干燥的環(huán)境中儲(chǔ)存長(zhǎng)達(dá)七天。好的商用冰箱的冰箱部分應(yīng)該足夠了。不建議在配制后七天內(nèi)使用該溶液。

Fluorochorome熒光金(Fluoro-Gold)抗體的使用：

氟金可以用幾種不同的方法注射，包括壓力法、離子電滲法和各種研究人員開(kāi)發(fā)的其他應(yīng)用。參見(jiàn)Schmued和Fallon，F(xiàn)luoro-Gold：“一種具有眾多獨(dú)-特財(cái)產(chǎn)的熒光逆行軸突示蹤劑"，《大腦研究》，377（1986）147-154，以及Pieribone和Aston-Jones，“熒光金在深部腦核傳入研究中的離子導(dǎo)入應(yīng)用"，《腦研究》，475（1988）259-271。許多研究人員開(kāi)發(fā)了自己的改進(jìn)程序。抗體的使用不應(yīng)依賴(lài)于使用熒光金的方法。

注射Fluoro Gold后，將漂浮切片（使用了灌注了4%甲醛的大鼠的30μm切片）與Fluoro金抗體溶液在4℃下孵育過(guò)夜。將切片清洗，然后在生-物-素化GAR（Vector Labs）中以1/1000在室溫下孵育1小時(shí)，然后再次清洗。然后將切片在Avidin/Biotin（Vector Labs）中以1/1000孵育1小時(shí)，洗滌并轉(zhuǎn)移至二氨基聯(lián)苯胺（.04%）和氯化鎳（2.5%）中的0.1M乙酸鈉和0.06%H2O2中6分鐘。然后清洗、安裝、干燥、脫水并蓋上蓋子。

根據(jù)經(jīng)驗(yàn)，如果按照上述方式儲(chǔ)存和制備，如果您使用Vector精英試劑盒，每小瓶抗體應(yīng)處理300至1000個(gè)30μm的白化大鼠腦（或類(lèi)似大小的動(dòng)物）切片。然而，您應(yīng)該嘗試集中注意力和程序，以確定哪一個(gè)最-適合您的環(huán)境。

熒光金(Fluoro-Gold)抗體根據(jù)不同規(guī)格分為單管和二管：

熒光金抗體-單管/100ul（FC20001）

熒光金抗體-2管/2x100ul（FC20002）