Cayman Chemical 人類雌激素相關(guān)受體β報告物測定系統(tǒng)（37049）背景：

INDIGO雌激素相關(guān)受體測定利用專有的人類哺乳動物細胞，該細胞被設(shè)計為提供人類雌激素相關(guān)受體β（NR3B2）雜交形式的高水平表達。

該雌激素相關(guān)受體β（ERRβ）測定試劑盒是一種全-方-位螢火蟲熒光素酶報告物測定系統(tǒng)，除ERRβ報告細胞外，還包括兩種用于細胞培養(yǎng)和稀釋用戶測試樣品的優(yōu)化培養(yǎng)基，參考反向激動劑4-羥基他-莫-昔-芬，用于制備熒光素素酶檢測試劑的試劑，以及詳細的協(xié)議。

ERRβ報告細胞使用INDIGO的專有CryoMite制備™ 過程這種冷凍保存方法在解凍后產(chǎn)生高細胞活力，并提供了立即將健康、分裂合格的報告細胞分配到測定板中的便利。不需要中間的旋轉(zhuǎn)和洗滌步驟、活力測定或細胞滴度調(diào)整。

圖：人ERRβ的劑量反應(yīng)分析。ERRβ報告細胞用不同濃度的A處理。激動劑GSK4716和DY131（Tocris）和B.反向激動劑4-羥基他-莫-昔-芬（提供）。平均相對光單位（RLU）及其對應(yīng)值分別測定了標準偏差和變異系數(shù)百分比處理濃度（n=3）。折疊激活值（F/A）和折疊減少值（F/R）

在ERR中，β活性是通過標準化測試中相應(yīng)的RLU值來計算的化合物處理過的報告細胞的RLU值與未處理的報告細胞相比。Z’值按照Zhang等人（1999）的描述計算.非線性回歸和

使用GraphPad Prism軟件進行相應(yīng)的EC50和IC50測定。

Cayman Chemical 艾美捷該組件和儲存條件：

此人類ERRβ檢測試劑盒包含執(zhí)行三組不同檢測的材料以96孔板格式。試劑的配置使得每組包含32個分析。然而，如果需要，可以組合試劑以進行64或96次測定。報告細胞對溫度敏感！為了確保細胞管的最大活力必須保持在-80°C，直到快速解凍程序之前。

化驗試劑盒在干冰上運輸。收到后將其轉(zhuǎn)移至-80°C的倉庫。如果您希望首先檢查和清點各個套件組件，確保首先轉(zhuǎn)移并將報告細胞管浸入干冰中。報告細胞的等分試樣作為一次性試劑提供。解凍后，細胞不能再冷凍，也不能在長期培養(yǎng)中保持保持下游測定性能。因此，這些試劑的額外體積應(yīng)在化驗設(shè)置后丟棄。

Cayman Chemical 該組件試驗化合物的制備：

小分子測試化合物通常以高濃度溶劑化在DMSO中；理想情況下，1000倍的濃縮原液相對于測定。使用高濃度貯存物可最大限度地減少DMSO帶入分析盤子。在建立分析之前，使用兩種備選策略之一：

1.）化合物篩選介質(zhì)（CSM）可用作稀釋劑，進行連續(xù)稀釋以獲得所需的最終測定濃度系列。

2.）DMSO可用于連續(xù)稀釋，從而產(chǎn)生1000倍的濃縮每個獨立測試濃度的儲備。然后使用

CSM對制備的DMSO稀釋系列進行最終1000倍稀釋。無論使用何種稀釋方法，攜帶的DMSO總量的最終濃度進入分析孔的濃度不應(yīng)超過0.4%，預(yù)計高于0.4%。

注：CSM的配制有助于穩(wěn)定測定混合物的水環(huán)境。盡管如此在CSM中稀釋的極疏水性測試化合物可能缺乏長期特別是如果進一步在低溫下儲存。因此，它建議立即在CSM中制備測試化合物稀釋液并且被認為是“一次性"試劑。

Cayman Chemical涉及癌癥、腫瘤、氧化損傷、凋亡、氧化性損傷、代謝、內(nèi)分泌學(xué)等多種研究領(lǐng)域。艾美捷科技是Cayman Chemical的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。