細胞衰老（Cell senescence）是細胞控制其生長潛能的保障機制，一般含義是復(fù)制衰老（Replicative senescence，RS），指正常細胞經(jīng)過有限次數(shù)的分裂后，停止分裂，此時細胞雖然是存活的，但是細胞形態(tài)和生理代謝活性發(fā)生明顯變化的現(xiàn)象。體外衰老細胞研究常用的生物學(xué)特征包括：1）不可逆的生長停滯；2）與衰老相關(guān)的β-半乳糖苷酶（senescence associated β-galactosidase, SA-β-gal）的活化。作為溶酶體內(nèi)的水解酶，通常在pH 4.0的條件下表現(xiàn)活性，但是衰老細胞內(nèi)其在pH 6.0的條件下表現(xiàn)活性，且隨著傳代次數(shù)的增加，細胞群體中表現(xiàn)衰老相關(guān)的β-半乳糖苷酶的細胞數(shù)目逐漸增加。

艾美捷細胞衰老β-半乳糖苷酶染色試劑盒提供了一種易于使用和有效的方法來確定細胞

衰老。SA-β-半乳糖苷酶催化X-gal的水解，產(chǎn)生藍色。每個試劑盒提供足夠的量在35毫米培養(yǎng)皿中進行多達50次檢測。

艾美捷細胞衰老β-半乳糖苷酶染色試劑盒套件組件：

1. 100X Fixing Solution ( 40010): One tube – 1.5 mL of 25% Glutaraldehyde

2. Staining Solution A ( 40011): One tube – 1.5 mL of 500 mM Potassium Ferrocyanide

3. Staining Solution B ( 40012): One tube – 1.5 mL of 500 mM Potassium Ferricyanide

4. Staining Solution C ( 40015): One bottle – 4.5 mL of 1 M Citrate-Na2HPO4 Buffer, pH

6.0, 50 mM MgCl2

5. Staining Solution D ( 40016): One bottle – 4.0 mL of 5 M NaCl

6. X-gal Solution ( 40014): Two tubes – 1.5 mL of 40 mg/mL X-gal in DMF in each tube

艾美捷細胞衰老β-半乳糖苷酶染色試劑盒相關(guān)研究：

1. CBA-080: CytoSelect™ 24-Well Anoikis Assay

2. CBA-081: CytoSelect™ 96-Well Anoikis Assay

3. CBA-231: 96-Well Cellular Senescence Assay Kit (SA-b-gal Activity, Fluorometric Format)

4. CBA-232: Quantitative Cellular Senescence Assay (SA β-Gal)

5. CBA-240: CytoSelect™ Cell Viability and Cytotoxicity Assay

6. AKR-100: b Galactosidase Staining Kit

試劑的制備：

•1X固定溶液：通過將提供的100X原液稀釋成1:100的1X溶液，制備1X固定溶液

PBS。將稀釋的溶液在室溫下儲存六個月。

•細胞染色工作溶液：根據(jù)

樣本數(shù)量。以下圖表適用于35mm板中的樣品

相應(yīng)地修改以適合其他培養(yǎng)板尺寸。