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彈性蛋白酶,由動(dòng)物的胰臟用水提取而得,也可用細(xì)菌的培養(yǎng)液在低溫下用水提取而得。
彈性蛋白酶的用途:
在醫(yī)學(xué)臨床主要用于治療高血脂癥,防止動(dòng)脈粥樣硬化、脂肪肝。也可用于肉類和水產(chǎn)加工中的嫩化。
彈性蛋白酶的化學(xué)性質(zhì):
1.其外觀呈淡黃色至深黃色粉末,也可是淺褐至深褐色液體??扇苡谒蝗苡谝掖?,有吸濕性。
2.純胰彈性蛋白酶,由240個(gè)氨基酸殘基組成的單一肽鏈,相對(duì)分子質(zhì)量約為25000,等電點(diǎn)為9.5。
3.彈性蛋白酶 可使結(jié)締組織蛋白質(zhì)中的彈性蛋白消化分解,包括肽鍵結(jié)合的、酰胺結(jié)合的和酯結(jié)合的進(jìn)行加水分解。作用的最適pH值7.8,最適作用溫度25℃。
4.彈性蛋白酶 具有明顯的β-脂蛋白酶作用,能活化磷酯酶A,降低血清膽丨固醇,改善血清脂質(zhì),降低血漿膽丨固醇及低密度脂蛋白、甘油三酯,升高高密度脂蛋白、阻止脂質(zhì)向動(dòng)脈壁沉積和增大動(dòng)脈的彈性,具有抗動(dòng)脈粥樣硬化及抗脂肪肝作用。
5.彈性蛋白酶最初以酶原的形式存在,經(jīng)過酶切后才有活性。
Worthington公司彈性蛋白酶特異性:
豬彈性蛋白酶 I 對(duì) Ala-Ala 和 Ala-Gly 鍵具有特異性,而彈性蛋白酶 II 對(duì) P1 位具有中等至大疏水性氨基酸的底物具有廣泛的特異性(Gertler等人1977、Del Mar等人1980 和Gestin等人,1997)。豬彈性蛋白酶是有效的彈性蛋白酶,其速率是人類白細(xì)胞彈性蛋白酶的 20 倍(Bieth 1978、Bieth 1986 和 Largman 1983)。
水解發(fā)生在幾個(gè)步驟中。彈性蛋白酶與其底物之間形成吸附復(fù)合物,然后進(jìn)行親核攻擊(S214)以形成?;钢虚g體,并釋放個(gè)產(chǎn)物(底物的C末端)。中間體在脫?;襟E中水解,再生活性酶并釋放第二個(gè)產(chǎn)物 (Bieth 1986)。
Worthington公司彈性蛋白酶分子特征:
豬胰彈性蛋白酶由 240 個(gè)氨基酸的單肽鏈組成,并含有 4 個(gè)二硫鍵 (Sawyer et al . 1973)。它與來自其他物種的胰腺彈性蛋白酶具有高度的序列同一性,例如與其共享 86% 同一性的大鼠(MacDonald等人,1982)。彈性蛋白酶 I 和 II 基因具有序列相似性,尤其是在 5' 近端側(cè)翼區(qū)域,包括 TATA 盒和推定的組織特異性增強(qiáng)子序列(Ornitz等人1985、Stevenson等人1986、Swift等人1984, Tani等人1987 和 Gestin等人1997)。
Worthington公司彈性蛋白酶的應(yīng)用:
1.組織解離:因?yàn)閺椥缘鞍自诮Y(jié)締組織的彈性纖維中的濃度最高,所以經(jīng)常使用彈性蛋白酶解離含有廣泛細(xì)胞間纖維網(wǎng)絡(luò)的組織。為此,它通常與其他酶一起使用,例如膠原酶。
2.膜蛋白溶解
3.蛋白質(zhì)序列研究
Worthington公司專注于生物技術(shù)和生命科學(xué)研究,診斷,生物制藥和生物加工應(yīng)用的高質(zhì)量純化酶,蛋白質(zhì),核酸和試劑盒。艾美捷科技是Worthington公司的中國代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。
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