艾美捷 Nanoprobes Ni-NTA-Nanogold 特點(diǎn)：

1.10 nm Ni-NTA-Nanogold®新的！直接 EM viualization 的最佳尺寸 用于嵌入后標(biāo)記

2.5 nm Ni-NTA-Nanogold®直接進(jìn)入EM -無(wú)需銀/金增強(qiáng)！

3.1.8 nm Ni-NTA-Nanogold®非常適合冷凍電鏡：最小的探頭：最佳穿透力和最高分辨率

Ni-NTA-Nanogold ®設(shè)計(jì)用于使用電子顯微鏡、光學(xué)顯微鏡或印跡檢測(cè)或定位多zu氨酸 (his) 標(biāo)記的融合蛋白。

Ni-NTA-Nanogold ®包含一個(gè) 1.8 nm 或 5 nm Nanogold® 顆粒，其中多個(gè)鎳-次氮基三乙酸官能團(tuán)結(jié)合到金顆粒表面的配體中。鎳-次氮基三乙酸官能團(tuán)與標(biāo)記蛋白中的zu氨酸結(jié)合，并形成具有J低解離常數(shù)的穩(wěn)定復(fù)合物。

使用Nanoprobes Ni-NTA-Nanogold ®，可以在非變性或變性條件下標(biāo)記源自多種表達(dá)載體中的任何一種的帶his標(biāo)簽的融合蛋白。當(dāng)與金或銀增強(qiáng)試劑（例如GoldEnhance™或HQ Silver）一起使用時(shí)，可以通過(guò)顯微鏡或印跡觀察標(biāo)記的帶 hist 標(biāo)簽的融合蛋白。

10 nm Ni-NTA-Nanogold®——無(wú)需銀或金增強(qiáng)，同時(shí)保留原始 1.8 nm 和 5 nm 探頭的高分辨率。

整個(gè)探針的大小與未標(biāo)記的 IgG 分子相似，但較大的金顆粒可以在沒(méi)有銀或金增強(qiáng)的標(biāo)準(zhǔn) TEM 下清晰可見(jiàn)，即使在較寬的視圖中，例如厚切片和整個(gè)細(xì)胞。由于較大的金，印跡靈敏度將比較小的尺寸更高。

1.高可見(jiàn)度：10 nm 金顆粒高度單分散，在大多數(shù)沒(méi)有銀或金增強(qiáng)的樣品中，在 TEM 分辨率下清晰可見(jiàn)。

2.用于標(biāo)記任何帶 His 標(biāo)簽的融合蛋白的通用探針：這簡(jiǎn)化了標(biāo)記，因?yàn)樗捎糜跇?biāo)記許多不同的靶標(biāo)，而無(wú)需生成不同的抗體。它還可以與不同尺寸的金顆?；蜚y或金增強(qiáng)的 Nanogold ®一起用于多種標(biāo)記研究。

3.較精確的標(biāo)記分辨率：次氮基三乙酸 - Ni(II) 螯合物與金表面之間的聯(lián)系比抗體或蛋白質(zhì)小得多，因此結(jié)合的金更靠近其目標(biāo)：我們估計(jì)與金顆粒表面的距離His 標(biāo)簽的長(zhǎng)度約為 2 nm。另外，這是一個(gè)初級(jí)探針：沒(méi)有二級(jí)抗體來(lái)增加與目標(biāo)的距離。使用 NTA-Ni(II)-Nanogold ®以分子分辨率定位蛋白質(zhì)復(fù)合物或其他大分子組裝體中的位點(diǎn)。

4.高溶解性、生物相容性和穩(wěn)定性：10 nm Ni-NTA-Nanogold ®是使用穩(wěn)定、高度親水的表面功能化制備的。

5.強(qiáng)結(jié)合：Ni(II)-NTA 的結(jié)合常數(shù)非常高，這是由于多個(gè)zu氨酸結(jié)合的螯合效應(yīng)和多個(gè) Ni(II)-NTA 功能的靶結(jié)合的結(jié)合。解離常數(shù)估計(jì)在10 -7到10 -13 M -1之間。對(duì)于許多應(yīng)用，這提供了與抗體相當(dāng)?shù)慕Y(jié)合強(qiáng)度。

6.高穿透性：10 nm Ni-NTA-Gold 的大小與未標(biāo)記的抗體 IgG 分子相似，并且比 10 nm 膠體金-抗體偶聯(lián)物小得多。因此，它可以比 10 nm 免疫金探針更好地滲透到樣本中并進(jìn)入空間受限的內(nèi)部位點(diǎn)，而無(wú)需額外的未標(biāo)記初級(jí)質(zhì)量，并提供更高的標(biāo)記密度。在某些系統(tǒng)中，它可以用于更強(qiáng)的固定或更少的透化，從而使標(biāo)記具有更好的超微結(jié)構(gòu)保存。

7.超高靈敏度：當(dāng)用于檢測(cè)印跡上帶有 His 標(biāo)簽的目標(biāo)時(shí)，較大的金顆粒提供最高的靈敏度，幾乎沒(méi)有背景。

上圖：NTA-Ni(II)-5 / 10 nm Nanogold ®的結(jié)構(gòu)，顯示了摻入的金屬螯合物與帶 His 標(biāo)簽的蛋白質(zhì)的結(jié)合。從金顆粒表面到 His 標(biāo)簽的距離估計(jì)為 1.5 nm。上圖：5 nm NTA Nanogold的透射電子顯微照片：平均直徑 5.11±0.84nm。

艾美捷 Nanoprobes Ni-NTA-Nanogold ®探針的應(yīng)用：

1.以納米精度闡明蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的混合方法：

由 Wei-hau Chang 博士小組開(kāi)發(fā)(Chang, 2013)

1）在 cryo-EM 中同時(shí)使用 1.8 nm 和 5 nm Ni-NTA-Nanogold® 以獲得更好的單粒子分析

2）結(jié)合 FRET 進(jìn)一步完善您的蛋白質(zhì)圖譜并觀察相互作用過(guò)程中的構(gòu)象/位置變化

2.用于 EM 的鎳染色 His-tags：對(duì)含有重組 His-tagged 蛋白質(zhì)的蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)復(fù)合物或細(xì)胞器進(jìn)行高分辨率標(biāo)記，用于 TEM 或 STEM 定位。

3.組織切片中帶His標(biāo)簽的蛋白質(zhì)的“通用"預(yù)嵌入標(biāo)記，用于電子顯微鏡觀察。

4.在 Ni-NTA 柱純化過(guò)程中識(shí)別餾分中的 His 標(biāo)簽蛋白。

5.檢測(cè)印跡和凝膠中的重組 His 標(biāo)簽蛋白。

6.用于圖像分析和結(jié)構(gòu)求解的規(guī)則結(jié)構(gòu)的重原子標(biāo)記。

7.用于 EM 的蛋白質(zhì)融合標(biāo)簽的金標(biāo)記

Nanoprobes專注于免疫金標(biāo)記和免疫測(cè)定試驗(yàn)領(lǐng)域，為廣大科研機(jī)構(gòu)提供用于檢測(cè)生物分子的靈敏的試劑和技術(shù)。艾美捷科技是Nanoprobes的中國(guó)代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。