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當(dāng)前位置:武漢艾美捷科技有限公司>>技術(shù)文章>>Nanoprobes免疫測(cè)定丨FluoroNanogold免疫染色
艾美捷 Nanoprobes 雙標(biāo)記免疫細(xì)胞化學(xué)和免疫組織化學(xué)試劑:FluoroNanogold——特別的 Fab 片段探針包含 1.4 nm Nanogold® 顆粒和熒光素?zé)晒鈭F(tuán),可在單個(gè)標(biāo)記過程中同時(shí)對(duì)*相同的結(jié)構(gòu)進(jìn)行熒光和電子顯微鏡觀察。該探針比整個(gè) IgG 分子小,不會(huì)聚集,并且由于金顆粒而導(dǎo)致的熒光猝滅可以忽略不計(jì)。
艾美捷 Nanoprobes FluoroNanogold:是一種特別的兩用探針。FluoroNanogold TM試劑由用熒光素和 1.4 nm Nanogold 顆粒標(biāo)記的親和純化的 Fab' 片段(來自山羊抗小鼠 IgG、山羊抗兔 IgG 和其他多克隆 IgG 抗體)組成。在熒光顯微鏡下,這些探針可以像傳統(tǒng)的熒光標(biāo)記抗體一樣使用,2而在電子顯微鏡下,它們的可視化方式與 Nanogold ®試劑*相同. 3熒光和電子顯微鏡的結(jié)合,或稱為相關(guān)顯微鏡,允許在兩個(gè)顯微鏡中對(duì)相同的較精確結(jié)構(gòu)進(jìn)行成像。共價(jià)標(biāo)記連接是無限期穩(wěn)定的,在鉸鏈硫醇位點(diǎn)的連接確保極大程度地保留天然免疫反應(yīng)性。這些試劑以 0.08 mg/mL 的 Fab' 濃度提供,溶解在 20 mM 磷酸鹽緩沖鹽水 (150 mM NaCl) 中,pH 7.4,含 0.1% BSA 和 0.05% 疊丨氮化鈉作為防腐劑。每種偶聯(lián)物的標(biāo)記程度通常是一個(gè) Nanogold ®粒子和每個(gè) Fab 分子 2-3 個(gè)熒光團(tuán),準(zhǔn)確的標(biāo)記程度在產(chǎn)品規(guī)格表上注明。FluoroNanogold TM偶聯(lián)物應(yīng)儲(chǔ)存在 2-8°C。不要凍結(jié)。避光。
使用艾美捷 Nanoprobes FluoroNanogold試劑進(jìn)行免疫染色的一般注意事項(xiàng):
基本上,標(biāo)簽的每個(gè)組成部分的常規(guī)方法都可以成功地與 FluoroNanogold TM標(biāo)記試劑一起使用。由于金顆粒對(duì)熒光的某些猝滅,建議在孵育時(shí)使用稍高濃度的抗體。已發(fā)現(xiàn) 5% 脫脂奶粉的封閉劑在某些情況下可減少非特異性背景染色:這應(yīng)在與探針孵育之前使用(在標(biāo)準(zhǔn)清洗/封閉步驟中),此外,FluoroNanogold TM探針可以稀釋在使用時(shí)還含有 1% 脫脂奶粉的溶液中。
艾美捷 Nanoprobes FluoroNanogold特性:
1.FluoroNanogold TM含有J其均勻的 1.4 nm 直徑金顆粒 (±10%)。
2.熒光素的吸收最大值出現(xiàn)在 494 nm 附近,發(fā)射最大值在 518 nm 附近。
3.FluoroNanogold TM -Fab' 小于單個(gè)完整的 IgG 分子。它并不比 Fab'-Nanogold ® 大很多,Fab'-Nanogold ®是市售的最小的金免疫探針,并且可以穿透并到達(dá)其他金探針無法接觸到的抗原。
4.FluoroNanogold TM -Fab 通過凝膠過濾柱進(jìn)行色譜純化。沒有聚集體或其他分子量雜質(zhì)。這與膠體金偶聯(lián)物形成鮮明對(duì)比,膠體金偶聯(lián)物通常通過離心制備以去除最大的聚集體,并且通常包含較小的聚集體。
5.接近 1 Nanogold ®到 1 Fab' 使該產(chǎn)品與膠體金 - 抗體制劑的 0.2 - 10 可變化學(xué)計(jì)量不同。
6.FluoroNanogold TM顆粒不像膠體金那樣對(duì)蛋白質(zhì)具有親和力。這減少了背景和錯(cuò)誤標(biāo)記。
7.FluoroNanogold TM 與大多數(shù)膠體金相比,銀和金的顯影效果更好,因此具有更高的靈敏度。銀和金增強(qiáng)均可用于使免疫標(biāo)記可用于電子顯微鏡、光學(xué)顯微鏡和免疫印跡,并改善結(jié)果。
Nanoprobes專注于免疫金標(biāo)記和免疫測(cè)定試驗(yàn)領(lǐng)域,為廣大科研機(jī)構(gòu)提供用于檢測(cè)生物分子的靈敏的試劑和技術(shù)。艾美捷科技是Nanoprobes的中國(guó)代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。
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