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艾美捷Epigentek染色質(zhì)可及性檢測試劑盒原則與程序

時間:2022/6/9閱讀:135
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艾美捷Epigentek EpiQuik™ 染色質(zhì)可及性檢測試劑盒是一套完整的優(yōu)化試劑,旨在通過實時 PCR 對各種生物樣品的核小體/轉(zhuǎn)錄因子定位進行染色質(zhì)可及性的基因特異性分析。它是快速檢測開放和封閉染色質(zhì)的一種經(jīng)濟有效且有用的工具。

 

艾美捷Epigentek  EpiQuik™ 染色質(zhì)可及性檢測試劑盒特點:

1、J其快速和方便的方案,使整個過程(從細胞組織樣本到用于 PCR 的即用 DNA)在短短 小時 30 分鐘內(nèi)完成。

2、能夠用于培養(yǎng)的細胞以及新鮮和冷凍的組織。

3、快速過程可最大限度地減少核損傷和分離染色質(zhì)成分的損失,保留染色質(zhì)結構。

4、試劑盒中包含人用內(nèi)部對照引物作為參考,用于分析樣本 DNA 中特定基因靶標的染色質(zhì)可及性程度,以及驗證是否實現(xiàn)了適當?shù)拿赶?/span>

5、可以選擇單反應測定或高通量多反應測定,使測定靈活。

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背景資料

染色質(zhì)中調(diào)控元件的可及性對于基因調(diào)控的許多方面都至關重要。位于調(diào)節(jié)元件上的核小體抑制轉(zhuǎn)錄因子接近 DNA。為了闡明染色質(zhì)和轉(zhuǎn)錄因子之間相互作用的作用,通過繪制核小體沿基因組的定位來確定染色質(zhì)的可及性至關重要。一般來說,染色質(zhì)越濃縮,轉(zhuǎn)錄因子和其他 DNA 結合蛋白就越難接近 DNA 并執(zhí)行它們的任務。DNA 越容易接近,周圍的基因就越有可能被主動轉(zhuǎn)錄。核小體的存在(或不存在)直接或間接影響多種其他細胞和代謝過程,例如重組、復制、著絲粒形成和 DNA 修復。

 

艾美捷Epigentek EpiQuik™ 染色質(zhì)可及性檢測試劑盒原則與程序

EpiQuik™ 染色質(zhì)可及性檢測試劑盒包含通過實時 PCR 對細胞/組織樣本的染色質(zhì)可及性進行基因特異性分析所需的所有必要試劑。該試劑盒包括用于確定染色質(zhì)消化是否成功的內(nèi)部對照引物。在該測定中,染色質(zhì)從細胞/組織中分離出來,并用核酸酶混合物進行處理。然后使用實時 PCR 分離和擴增 DNA,以對染色質(zhì)可及性進行區(qū)域特異性分析。染色質(zhì)狀態(tài)可以根據(jù) DNA 對核酸酶的可及性來識別。外部蛋白質(zhì)(包括外源性核酸酶)無法接近異染色質(zhì)中的 DNA,使其受到核小體或 DNA/蛋白質(zhì)復合物的保護,并可用于隨后的 PCR,消化和未消化樣品之間的 Ct 變化微不足道。相比之下,常染色質(zhì)中的 DNA(核小體消耗)可被外源核酸酶訪問,使其易受核酸酶消化,并且由于消化和未消化樣品之間的大 Ct 偏移而無法用于 PCR。

 

起始材料和輸入量

起始材料可以包括各種哺乳動物組織或細胞樣品,例如來自燒瓶或微孔板培養(yǎng)細胞的細胞、新鮮和冷凍組織等。每個反應的細胞/組織量可以來自 1 x 10 5 個 細胞或2 mg 組織至 2 x 10 6 個 細胞或 40 mg 組織。為獲得最佳反應,輸入染色質(zhì)量應約為 0.5 x 10 6 個 細胞或 10 mg 組織。

 

Epigentek相關研究:

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Epigentek研究包括400多個磚利組合,為表觀遺傳學方面的研究和新藥研發(fā)提供全面系統(tǒng)的解決方案。艾美捷科技是Epigentek的中國代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務。


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