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艾美捷 MITO-ID®線粒體膜電位細(xì)胞毒性試劑盒利用陽離子雙發(fā)射染料測量線粒體膜電位(MMP)的波動,該染料在細(xì)胞質(zhì)中以綠色熒光單體存在,并在線粒體中累積為橙色熒光J-聚集體。具有低膜電位的線粒體將積聚低濃度的染料,并顯示綠色熒光,而更高J化的線粒體將顯示橙紅色熒光。隨著線粒體功能日益受損,細(xì)胞呈現(xiàn)出從橙色到綠色熒光的轉(zhuǎn)變。該試劑盒是一種*的HTS分析方法,可實時監(jiān)測線粒體膜電位,無需清洗或去除培養(yǎng)基。
艾美捷 MITO-ID®線粒體膜電位細(xì)胞毒性試劑盒作用機制:
染料的基本化學(xué)結(jié)構(gòu)由高度共軛的部分組成,這些部分廣泛地去定域化正電荷,從而允許電泳吸收到J化線粒體內(nèi)膜的負(fù)電荷基質(zhì)相。染料能夠選擇性地進(jìn)入線粒體,隨著膜電位的增加,其顏色可逆地從綠色變?yōu)槌壬p發(fā)射電位探針)。這種光物理性質(zhì)是由于膜J化時J-聚集體的可逆形成,當(dāng)在490 nm激發(fā)時,會導(dǎo)致發(fā)射光從~530nm(單體染料的發(fā)射)移動到590 nm(J-聚集體形式的發(fā)射)。因此,具有低膜電位的線粒體將積累低濃度的染料,并顯示綠色熒光,而更高J化的線粒體將顯示橙色熒光。
艾美捷MITO-ID®線粒體膜電位細(xì)胞毒性試劑盒是CELLESTIAL®試劑和分析試劑盒的成員,包括熒光分子探針,已在活細(xì)胞分析應(yīng)用中進(jìn)行了廣泛的基準(zhǔn)測試。CELLESTIAL®試劑和試劑盒適合用于要求嚴(yán)格的成像應(yīng)用,如共聚焦顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)和HCS,其中要求一致性和再現(xiàn)性。
艾美捷MITO-ID®線粒體膜電位細(xì)胞毒性試劑盒文獻(xiàn)參考:
FUNDC1 regulates receptor-mediated mitophagy independently of the PINK1/Parkin-dependent pathway in rotenone-treated SH-SY5Y cells: S.Y. Park, et al.; Food Chem. Toxicol. 137, 111163 (2020), Application(s): Fluorescence microscopy and microplate reader, Abstract;
Inhibitory role of TRIP-Br1/XIAP in necroptosis under nutrient/serum starvation: Z. Sandag, et al.; Mol. Cells 43, 236 (2020), Abstract; Full Text
NAD hydrolysis by the tuberculosis necrotizing toxin induces lethal oxidative stress in macrophages: D. Pajuelo, et al.; Cell. Microbiol. 22, e13115 (2020), Application(s): THP-1 macrophages; microplate reader, Abstract; Full Text
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