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HRP標記-純化兔抗雞IgY功能與參數(shù)

時間:2022/2/22閱讀:106
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辣根過氧化物酶

辣根過氧化物酶(HRP)結(jié)合物是通過改良的NakaneKawaoi程序制備的(J.Histochem.Ceythem.1974.22,1084)。過氧化物酶結(jié)合物通常用于免疫組織化學、免疫印跡和ELISA。親和純化的抗辣根過氧化物酶和結(jié)合物可用于檢測辣根過氧化物酶抗原或用于含HRP試劑的信號放大。對于哺乳動物細胞的免疫染色,使用抗辣根過氧化物酶的優(yōu)點是減少了背景,因為抗體不能識別在這些細胞中發(fā)現(xiàn)的內(nèi)源性過氧化物酶樣酶。

 

HRP易提取、價格低廉、性質(zhì)穩(wěn)定,耐熱及有機溶劑,與抗原或抗體偶聯(lián)后,活性很少受損失,在免疫學實驗中廣泛應用。

 

艾美捷/HRP標記-純化兔抗雞IgY適用于大部分免疫學實驗,基于免疫電泳和/或ELISA,抗體與雞IgY重鏈的Fc部分反應,但與雞免疫球蛋白的Fab部分不反應。未檢測到針對非免疫球蛋白血清蛋白的抗體??贵w可能與其他物種的免疫球蛋白發(fā)生交叉反應。

 

通過免疫親和層析從抗血清中分離出完整的IgG抗體。它們有一個Fc部分和兩個抗原結(jié)合Fab部分,通過二硫鍵連接在一起,因此它們是二價的。據(jù)報道,平均分子量約為160 kDa??贵w的整個IgG形式適用于大多數(shù)免疫檢測程序,且*成本效益。

 

艾美捷/HRP標記-純化兔抗雞IgYIgG),Fc端二抗其它參數(shù):

cat#:303-035-008

目標:雞

宿主:兔子

抗體格式:全IgG

特異性:IgY(IgG),Fc片段特異性

結(jié)合物:辣根過氧化物酶

類別:全IgG親和純化抗體

克隆性:多克隆

物理狀態(tài):凍干固體

儲存和再水化:將凍干固體儲存在2-8°C下。用指示體積的dH2O再水化,如果不清楚,則用離心機進行離心。在使用當天準備工作稀釋液。產(chǎn)品在2-8°C溫度下作為未稀釋液體穩(wěn)定約6周。

補液后的長期儲存:等分并在-70°C或更低溫度下冷凍。避免反復凍融?;蛘?,添加等量的甘油(ACS級或更好),最終濃度為50%,并作為液體儲存在-20°C下。

有效期:自補液之日起一年。如果試驗結(jié)果可用于預期用途,則有效期可延長。

純度:抗體通過免疫親和層析從抗血清中純化,使用抗原與瓊脂糖珠偶聯(lián)。

緩沖液:0.01M磷酸鈉,0.25M氯化鈉,pH 7.6

穩(wěn)定劑:15毫克/毫升牛血清白蛋白(不含IgG,不含蛋白酶)

防腐劑:無(警告:使用疊丨氮丨化鈉作為防腐劑將顯著抑制辣根過氧化物酶的酶活性。)

 

艾美捷/HRP標記-純化兔抗雞IgY建議的工作濃度或稀釋范圍:

1:500-1:5000用于免疫組織/細胞化學

1:5000-1:100000用于ELISA和帶有顯色底物的Western印跡

1:10000-1:200000用于ECL底物的蛋白質(zhì)印跡

 

稀釋系數(shù)以范圍的形式表示,因為zui+稀釋度是許多因素的函數(shù),例如抗原密度、滲透性等。實際使用的稀釋度須根據(jù)經(jīng)驗確定。

 


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