Annexin V是一種檢測細胞凋亡的試劑，在正常細胞中，磷脂酰絲丨氨酸只分布在細胞膜脂質雙層的內側，細胞發(fā)生凋亡早期，膜磷脂酰絲丨氨酸(PS)由脂膜內側翻向外側。Annexin V作為一種磷脂結合蛋白，與磷脂酰絲丨氨酸有高度親和力，它通過細胞外側暴露的磷脂酰絲丨氨酸與凋亡早期細胞的胞膜結合。因此Annexin V是檢測細胞早期凋亡的靈敏指標。
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艾美捷/Annexin V 是一種在大腸桿菌中表達的重組蛋白。細胞結構的一些變化在細胞凋亡過程中發(fā)生。一個主要的變化是膜磷脂不對稱性的喪失，伴隨著磷脂酰絲丨氨酸的移位(PS)從磷脂雙層的內小葉到外表面。
艾美捷/Annexin V建議的染色方案：
1.在冷PBS中清洗細胞兩次
2.在冷1X ApoScreen®中重新使用電池膜聯(lián)蛋白結合緩沖液(SB目錄號10045-01)濃度為1 x 106細胞/mL
3.加100mL細胞懸液至5mL聚苯乙烯圓底管
4.加10m共軛ApoScreen®Annexin V
5.輕輕旋轉每根試管，在2-8°C溫度下培養(yǎng)15分鐘，并避光
6.在不清洗的情況下，添加~380m冷1X ApoScreen®Annexin 結合緩沖液到每根管
7.加10mApoScreen®的L7-氨基放丨線丨菌素D(7-AAD；SB分類號10042-01)或ApoScreen®碘化丙啶(PI；SB類別號。
艾美捷/Annexin V儲存方式：
1.純化的(UNLB)ApoScreen®Annexin V 以0.1mg純化的重組蛋白形式從PBS中凍干。儲存材料在重構前的-20°C溫度下。用1.0毫升的dH2O重新配制。將再造材料儲存在2-8°C的溫度下。
2.熒光素(FITC)、BIOT和菁5(CY5)ApoScreen®附錄V結合物在1.0毫升的溶液中作為100次試驗提供ApoScreen®Annexin V 結合緩沖液。在2-8°C下儲存。
3.R-藻紅蛋白(PE)和別藻藍蛋白(APC)ApoScreen®在1.0毫升PBS/NaN3中，以100次試驗的形式提供膜Annexin V結合物和穩(wěn)定劑。在2-8°C下儲存。不要冷凍！
4.保護熒光色素結合物不受光照。如果按照指示儲存，試劑在標簽上顯示的時間內是穩(wěn)定的。
