1953年,Stein等用Dowex 50柱層析法測定人尿液中氨基酸時,在洗脫曲線上發(fā)現(xiàn)一個未知的茚三酮陽性物質(zhì)峰.尿液用酸水解后再作層析,這個峰仍存在,表明不是多肽.次年,Tallan等首丨次鑒定出這個峰是3-甲基組丨氨酸(3-methylhistidine,3-MH).
3-甲基組丨氨酸是一種翻譯后修飾的氨基酸,可從人體尿液中排出。3-甲基組丨氨酸在尿液中的濃度可作為肌肉損傷的人類的骨骼肌蛋白質(zhì)分解的可靠指標。
3-甲基組丨氨酸是參與組成骨骼肌收縮的蛋白的氨基酸成分。當肌肉收縮引起骨骼肌收縮蛋白分解時,釋放出3-甲基組丨氨酸,因肌細胞中無相應的分解及再利用的酶,故從尿中排出。食用豆制品和肉類,尤其是雞肉,尿液中的3-甲基組丨氨酸濃度也會升高。
艾美捷 3-甲基組丨氨酸(3-MH)ELISA試劑盒,基于競爭性酶聯(lián)免疫吸附測定技術。將3-MH預包被在96孔板上。將標準品、測試樣品和生丨物素偶聯(lián)試劑加入孔中并孵育。預包被的3-MH和樣品中的3-MH與含有生丨物素標記的抗體發(fā)生競爭性抑制反應。然后加入結合了HRP的試劑,并孵育整個板子。在每個階段使用洗滌緩沖液去除未結合的綴合物。TMB底物用于定量HRP酶促反應。添加TMB底物后,只有含有足夠3-MH的孔才會產(chǎn)生藍色產(chǎn)物,然后在加入酸性終止液后變?yōu)辄S色。黃色的強度與板上結合的3-MH量成反比。在酶標儀中于450 nm處用分光光度法測量OD,由此可以計算3-MH的濃度。
該3-甲基組丨氨酸(3-MH)ELISA試劑盒采用比色法,以血清、血漿等為樣本,用于體外定量測量血清、血漿等樣本中的3-甲基組丨氨酸(3-MH)濃度。且僅用于科研,不可用于臨床診斷。
3-甲基組丨氨酸(3-MH)標曲如下(經(jīng)過驗證):
以上就是有關3-甲基組丨氨酸(3-MH)ELISA試劑盒的簡單介紹。