羥脯氨酸((2S,4R)-4-羥脯氨酸,Hyp)是由脯氨酰-4-羥化酶形成的非蛋白源性氨基酸,它催化蛋白質(zhì)合成后多肽脯氨酸殘基的翻譯后修飾。在動(dòng)物體內(nèi),羥脯氨酸幾乎全部存在于膠原蛋白中,膠原蛋白中羥脯氨酸的質(zhì)量含量約為12-14%(纖維狀彈性蛋白也含有少量羥脯氨酸)。因此,組織水解物中的羥脯氨酸可直接測(cè)量膠原蛋白的含量。
膠原蛋白是哺乳動(dòng)物中含量zui豐富的蛋白質(zhì),許多疾病被認(rèn)為會(huì)影響膠原蛋白的轉(zhuǎn)化,包括腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、心肺纖維化和肌營(yíng)養(yǎng)不良。Hyp的經(jīng)典測(cè)定方法是將Hyp氧化成吡咯中間體,然后與溶解在濃高氯酸(HClO4)中的埃利希試劑反應(yīng)。高氯酸是一種有毒和高活性的有害物質(zhì),需要特殊的處理和廢物處理協(xié)議。
艾美捷 BioVision 羥脯氨酸檢測(cè)試劑盒II(不含高氯酸鹽)使用專有的酸性顯影液較精確測(cè)量組織和蛋白質(zhì)/肽酶水解物中的Hyp,而無(wú)需使用危險(xiǎn)的高氯酸鹽。這是一個(gè)快速方便的方案,產(chǎn)生了一個(gè)顏色鮮艷的發(fā)色團(tuán),吸收峰在560nm處。該分析可檢測(cè)96孔格式的每孔至少0.05µg羥脯氨酸,并產(chǎn)生幾乎與經(jīng)典高氯酸法相同的比色結(jié)果。
艾美捷 Biovision 羥脯氨酸檢測(cè)試劑盒主要特點(diǎn):
1.非放射性、均質(zhì)分析;
2.特異性分析;
3.方便:較少的樣品制備;快速操作protocols;
4.經(jīng)濟(jì)高效:50/100次分析;兼容高通量篩選;
5.經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的:使用哺乳動(dòng)物組織、生物體液等。