鈣對于所有生物來說都是不可少的，因為鈣離子在生物體內(nèi)被吸收并釋放到生物體內(nèi)細胞質外信號是許多細胞過程的信號。99%的鈣是鈣在骨骼和牙齒中發(fā)現(xiàn)，其余1%在血液和軟組織中發(fā)現(xiàn)。血清鈣水平受到嚴格控制(8.4-11.4 mg/dL)，超出此范圍的任何變化都可能導致死亡有嚴重影響。鈣在調(diào)節(jié)血管收縮和舒張中起作用血管、神經(jīng)沖動傳遞、肌肉收縮和激素分泌。
鈣離子通道控制鈣離子在細胞膜上的遷移，允許激活和抑制多種酶。低鈣的原因這些水平包括慢性腎功能衰竭、維生素D缺乏和低血鎂水平這可能發(fā)生在嚴重的酒精中毒。BioVision的比色鈣測定試劑盒利用鈣離子與0-甲酚酞形成的顯色絡合物(λ=575nm)，以在生理上重要的鈣濃度0.4范圍內(nèi)提供一種簡單的測定方法-100毫克/分升(0.1-25毫米)。
艾美捷 BioVision 鈣比色法檢測試劑盒利用鈣離子和O-苯酞酚形成的顯色復合物(λ = 575 nm)的原理，使用O-苯酞酚與樣本中的鈣離子反應后通過比色計或分光光度計實現(xiàn)定量.
鈣含量比色檢測試劑盒測定方案：
1.標準曲線制備：通過添加10%的鈣，將鈣標準稀釋至5 mM(20 mg/dL)將500 mM標準溶液的µl與990µl dH2O充分混合。將0,2,4,6,8,10µl添加到一系列溶液中每孔提供0,0.4,0.8,1.2,1.6,2.0µg鈣。將體積增加到50µl，并使用二氧化二氫。
2.樣品制備：血清或尿液樣品可直接用于本試驗。放置10微升在96孔板中的孔中取樣。對于其他液體樣品，將2–50µl樣品添加到溶液中個人井。用dH2O使總體積達到50µl。樣品可以化驗沒有任何事先治療。一些MRI造影劑會在這種情況下引起短暫的干擾化驗
3.補充：
A) 將90µl顯色試劑添加到每個含有標準品、樣品或試劑的孔中控制并輕輕混合。
B) 向每個孔中添加60µl鈣分析緩沖液并輕輕混合。
4.在室溫下培養(yǎng)反應5-10分鐘。避光。
5.在575 nm處測量外徑。發(fā)色團是不穩(wěn)定的，隨著時間的推移會稍微褪色，所以在30分鐘內(nèi)閱讀標準品和樣品。
6.計算：通過減去從0計算得出的值來校正背景所有樣品和標準讀數(shù)的控制(注：背景讀數(shù)可能為重要，必須從樣本讀數(shù)中減去)。繪制標準曲線µg/井vs。外徑575納米讀數(shù)。然后將樣本讀數(shù)應用于標準曲線，以獲得井中的鈣樣本量(Sa)。試樣中的鈣濃度：C=Sa/Sv(微克/微升或毫克/毫升)式中：Sa是標準曲線中的鈣樣品量(單位：µg)。Sv是添加到樣品孔中的樣品體積(µl)。鈣分子量：40。樣品中的鈣濃度可以表示為mg/ml、mg/dL或mM(mmol/升)。1毫克/毫升=100毫克/分升；1毫米=4毫克/分升
圖：(a) 標準曲線。(b) 從匯集的人血清(10μl，1:1稀釋)和混合人類尿液(10μl，1:1稀釋)。試驗在試驗結束后進行工具包協(xié)議。
